贵州百香果主要种植区病毒种类的检测

摘""要：百香果（Passiflora"edulis）作为贵州特色优势水果，在巩固脱贫攻坚成果和深入实施乡村振兴战略中具有重要意义。但近年来百香果病毒病危害日趋严重，造成产量和品质急剧下降，严重影响产业发展。为确定贵州百香果主要种植区病毒种类、分布及复合侵染情况，本研究从贵州省罗甸县、从江县、榕江县、镇宁县和贞丰县5个百香果主要种植区采集疑似感病叶片153份，采用RT-PCR技术对其进行检测。结果表明：样本共检测到7种病毒，分别是东亚西番莲病毒（East"Asian"Passiflora"virus，"EAPV）、夜来香花叶病毒（Telosma"mosaic"virus，"TeMV）、黄瓜花叶病毒（Cucumber"mosaic"virus，"CMV）、芜菁花叶病毒（Turnip"mosaic"virus，"TuMV）、西番莲斑驳病毒（Passiflora"mottle"virus，"PaMV）、西番莲潜隐病毒（Passiflora"latene"carlavirus，"PLV）和马铃薯Y病毒（Potato"virus"Y，"PVY）。EAPV检出率最高，达96.08%，以下依次为TeMV（81.70%）、CMV（78.43%）、TuMV（44.44%）、PaMV（26.80%）、PVY（24.84%）和PLV（15.03%）；值得重视的是，PVY主要为害马铃薯，而侵染百香果为首次报道。本次检测到的7种病毒的测序结果与相应参考序列的核酸一致性均在95%以上，经构建进化树发现，EAPV、TeMV、PaMV、PLV、TuMV分别与中国各省份的百香果病毒分离物存在一定的地理聚集性，而CMV和PVY分别与西班牙CMV甜瓜分离物和卢旺达PVY辣椒分离物亲缘关系最近，这说明这些病毒来源及感染途径复杂，未在国内大面积传播。本次共检测到24种复合侵染类型，以3～5种复合侵染类型为主，复合侵染率达94.77%，其中EAPV+TeMV+CMV组合是复合侵染中出现最多的类型；EAPV、TeMV和CMV的检出率高达78.43%～96.08%，在5个百香果主要种植区均有检出，且在多种复合侵染类型中普遍存在，因此这3种病毒为侵染贵州百香果主要种植区的优势病毒。此外，本研究建立了EAPV、TeMV和CMV的多重PCR检测体系，为相关病毒的快速检测提供技术支持。

关键词：贵州；百香果；病毒检测；RT-PCR；复合侵染

中图分类号：S436.67""""""文献标志码：A

Detection"of"Virus"Species"from"Main"Plantation"Areas"of"Passion"Fruit"（Passiflora"edulis）"in"Guizhou

YAN"Yixin，"QIAO"Guang，"ZHOU"Kui，"ZHANG"Manying，"LI"Ruirui，"WEN"Xiaopeng*

College"of"Life"Sciences，"Guizhou"University"/"Institute"of"Agro-bioengineering"/"Key"laboratory"of"Plant"Resource"Conservation"and"Germplasm"Innovation"in"Mountainous"Region"（Ministry"of"Education），"Guiyang，"Guizhou"550025，"China

Abstract："Passion"fruit"（Passiflora"edulis）"is"a"characteristic"and"advantageous"fruit"in"Guizhou，"which"is"of"great"significance"in"poverty"relief"consolidation"and"the"rural"revitalization."However，"in"recent"years，"the"viral"diseases"of"passion"fruit"have"become"increasingly"severe，"leading"to"a"sharp"decline"in"yield"and"quality，"which"thereby"seriously"constrain"industry"development"of"passion"fruit."In"order"to"determine"the"virus"species，"distribution"and"compound"infestation"in"the"main"plantation"areas"of"passion"fruit"in"Guizhou"province，"a"total"of"153"samples"suspectedly"infected"by"virus"were"collected"from"five"main"plantation"orchards"of"passion"fruit"in"five"counties，"i.e."Luodian，"Congjiang，"Rongjiang，"Zhenning"and"Zhenfeng，"and"the"virus"detection"was"carried"out"by"RT-PCR."The"results"showed"that"seven"viruses"were"detected"from"the"tested"samples，"namely"East"Asian"Passiflora"virus"（EAPV），"Telosma"mosaic"virus"（TeMV），"Cucumber"mosaic"virus"（CMV），"Turnip"mosaic"virus"（TuMV），"Passiflora"mottle"virus"（PaMV），"Passiflora"latene"carlavirus"（PLV），"and"Potato"virus"Y"（PVY），"among"which"PVY"infection"was"firstly"reported"from"passion"fruit."EAPV"was"the"most"prevalent"one"with"infection"rate"as"high"as"96.08%，"followed"consecutively"by"TeMV"（81.70%），"CMV"（78.43%），"TuMV"（44.44%），"PaMV"（26.80%），"PVY"（24.84%）"and"PLV"（15.03%）."In"the"present"case，"the"distribution"of"passion"fruit"viruses"in"Guizhou"province"and"the"diversity"of"virus"sequences"were"analyzed."Seven"viruses"were"detected"in"Zhenning，"six"in"Zhenfeng，"five"in"Rongjiang"and"Congjiang，"and"three"in"Luodian."There’snbsp;a"close"identity"between"the"nucleic"acid"of"the"seven"detected"viruses"and"the"corresponding"reference"sequences"（above"95%）."Phylogenetic"analysis"revealed"that"EAPV，"TeMV，"PaMV，"PLV"and"TuMV"somewhat"geographical"clustered"with"passion"fruit"virus"isolated"from"other"provinces"in"China."CMV"and"PVY"were"most"closely"related"to"Cucumis"melo"CMV"isolated"from"Spain"and"Capsicum"annuum"PVY"isolated"from"Rwanda"respectively，"suggesting"that"the"virus"sequences"diversely"varies"among"the"origins"in"China."A"total"of"24"types"of"mixed"infection"were"detected"in"the"main"growing"areas"of"passion"fruit"in"Guizhou，"and"the"complex"infection"rate"was"as"high"as"94.77%."The"complex"infection"with"3-5"types"predominated"in"the"tested"samples，"and"the"combination"of"EAPV+TeMV+CMV"was"most"frequent"among"the"complex"infections"among"which，"EAPV，"TeMV"and"CMV"detected"ranged"from"78.43%"to"96.08%"in"the"five"counties，"somehow"reflecting"that"they"were"the"major"viruses"to"prevent"in"passion"fruit"industry"of"Guizhou"province."In"addition，"a"multiplex"PCR"assay"system"for"EAPV，"TeMV"and"CMV"was"established"in"this"study，"which"provides"technical"support"for"the"rapid"detection"of"related"viruses.

Keywords："Guizhou;"Passiflora"edulis;"virus"detection;"RT-PCR;"complex"infestation

DOI："10.3969/j.issn.1000-2561.2024.07.020

百香果又称西番莲（Passiflora"edulis），是西番莲科（Passifloraceae）西番莲属（Passiflora"Linn.）多年生常绿藤本热带水果，原产于南美洲，我国引种栽培后主要分布在台湾、广西、贵州、福建、广东、海南和云南等亚热带及热带地区[1]。百香果作为“第三代新兴果树”[2]，集果用、药用、油用和庭院观赏为一体[3]，且当年种植当年挂果，经济见效快，我国不少地区将其列为“短、平、快”的农业项目[4]。

在百香果种植过程中，病毒病是其效益发挥的重要制约因素[5]。百香果感染病毒后，植株出现叶片黄化、花叶、畸变、卷曲，果实小且畸形，严重影响经济效益[1]。由于百香果多采用营养繁殖，且长期连作，使病毒病蔓延迅速[6]。目前，已报道能侵染百香果的病毒高达40余种，包括东亚西番莲病毒（East"Asian"Passiflora"virus，"EAPV）[7]、夜来香花叶病毒（Telosma"mosaic"virus，"TeMV）[8]、黄瓜花叶病毒（Cucumber"mosaic"virus，"CMV）[9]、西番莲木质化病毒（Passion"fruit"woodiness"virus，"PWV）[10]和豇豆蚜传花叶病毒（Cowpea"aphid-"borne"mosaic"virus，"CABMV）[11]等。在贵州种植的百香果上，严佳文等[12]检测到CMV和TeMV，任羽羽等[13]检测到PLV，这些结果为当地百香果产业发展及病毒病防控提供了参考，但这些检测仅涉及个别种植园，尚缺乏全省主要种植区病毒病种类和分布的报道。本研究拟采用RT-PCR法，对贵州百香果的病毒种类及复合侵染情况进行鉴定分析，旨在为全省范围内百香果果园规划、种苗繁育和病毒病防控等产业问题提供参考。

1""材料与方法

1.1""材料

2021—2022年，从贵州省罗甸县、从江县、榕江县、镇宁县和贞丰县百香果种植基地，采集百香果疑似感病叶片153份（表1），样品症状主要包括花叶、黄化、皱缩、卷曲等；另采集健康百香果种子萌发的实生苗叶片作为阴性对照。所有样品经液氮速冻后于–80"℃超低温冰箱保存备用。

1.2""方法

1.2.1""总RNA的提取""采用RNA提取试剂盒（Omega"Bio-Tek）提取疑似病毒侵染叶片混合样品总RNA，具体方法参照试剂说明书。用酶标仪测定其浓度和纯度，琼脂糖凝胶电泳检测其质量。

1.2.2""引物合成""根据GenBank上已登录的序列，利用Oligo"7软件设计EAPV、TeMV、CMV、TuMV、CABMV、PWV的特异性检测引物，PaMV、PLV、PVY的检测引物参考相关文献报道（表2），本研究所有引物均委托生工生物工程（上海）股份有限公司进行合成。

1.2.3""cDNA合成及RT-PCR扩增""以疑似病毒侵染的百香果叶片RNA为模板，逆转录合成cDNA第一链，具体过程见逆转录试剂盒说明书（TaKaRa宝生物工程有限公司）。以cDNA为模板，进行RT-PCR扩增，扩增体系为50"μL：2×"Canace"Gold"PCR"buffer"25"μL，Hieff"Canace"Gold"High-Fidelity"DNA"Polymerase"0.5"μL，10"μmol/L的上下游引物各2.5"μL，cDNA模板5"μL，无菌ddH2O补足后混合均匀。PCR具体反应程序为：98"℃预变性6"min；98"℃变性10"s，60"℃退火20"s，72"℃延伸30"s，循环35次；72"℃延伸5"min，4"℃保存。取PCR产物进行1%琼脂糖凝胶电泳，通过凝胶成像系统观察结果。PCR阴性对照为百香果无病毒侵染的实生苗。

1.2.4""PCR产物回收及测序""采用DNA凝胶回收试剂盒（TaKaRa宝生物工程有限公司）将特异性目的片段回收纯化，连接PEASY-Blunt载体（全式金生物技术股份有限公司产），转化至大肠杆菌感受态中，将PCR阳性克隆产物送至生工生物工程（上海）股份有限公司进行测序。测序结果与NCBI数据库中对应序列进行Blast比对。采用MEGA-7的邻接法（Neighbor-Joining，"NJ）进行1000次置信度自展分析，并构建进化树。

1.2.5""统计及分析""采用RT-PCR法，对采集的153份百香果疑似感病叶片进行病毒检测，统计病毒检出样本数、采集样本数、分布情况及贵州百香果病毒的复合侵染类型。病毒检出率=病毒检出样本数/采集样本数×100%。

1.2.6""多重RT-PCR扩增体系的优化和建立""以复合感染EAPV、TeMV和CMV病毒的百香果样品cDNA为模板，适量稀释后进行多重RT-PCR扩增。对多重RT-PCR体系的退火温度（50、52、54、56、58、60"℃）、引物含量（0.5、1、1.5、2"μL）和循环次数（20、25、30、35、40次）进行梯度设置，以优化该反应体系。PCR扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳，通过凝胶成像系统观察结果。利用优化建立后的多重RT-PCR扩增体系对采集的部分复合侵染样品进行检测，以验证该体系的准确性。

2""结果与分析

2.1""感病百香果表现症状

田间调查发现，在贵州省罗甸县、从江县、榕江县、镇宁县和贞丰县5个百香果主要种植区，均有病毒病发生，主要表现为叶片卷曲（图1A）、皱缩、畸形（图1B）、花叶、黄化、黄斑（图1C）、果皮斑驳（图1D）等症状。长期连作地区如贞丰、镇宁等，病毒病发生率明显高于新种植地区，新果园也有发生，说明苗木带毒。

2.2""样品病毒的RT-PCR检测

采用RT-PCR法对采集的153份样品进行9种病毒检测，结果显示，EAPV、TeMV、CMV、TuMV、PaMV、PLV和PVY共7对引物对可分别在286、395、690、306、261、840、447"bp处扩增出特异性条带，条带位置与预期大小吻合，清晰明亮（图2）。CABMV与PWV未扩增到预期大小的目的条带，表明样品中未检测出这2种病毒；百香果实生苗未扩增出条带，说明百香果实生苗不带病毒，可以作为阴性对照。

2.3""病毒序列分析

将上述检测到的7种病毒随机选取部分样品进行克隆测序，将获得的序列分别命名为EAPV-"GZ、TeMV-GZ、CMV-GZ、TuMV-GZ、PaMV-GZ、PLV-GZ和PVY-GZ，结果显示，这些序列与EAPV（KP114136）、TeMV（KJ789129）、CMV（KX 525733）、TuMV（KF246570）、PaMV（MK492286）、PLV（MK340756）和PVY（ON604844）核苷酸序列一致性非常高，分别为97.56%、98.41%、95.67%、98.37%、99.69%、99.23%和97.54%。

采用邻接法对7种病毒测序结果构建系统发育树，结果表明，EAPV-GZ、TeMV-GZ、PaMV-GZ、PLV-GZ和TuMV-GZ均与中国不同省份的百香果病毒分离物在同一个亚组，存在一定的地理聚集性。EAPV-GZ与台湾百香果EAPV分离物（KP 114136）有较近的亲缘关系（图3A）；TeMV-"GZ与广西百香果TeMV分离物（KJ789129）聚为一支（图3B）；TuMV-GZ除了与福建百香果TuMV分离物（MK340758）亲缘关系较近外，还与福建厦门蝴蝶兰TuMV分离物（KF246570）、中国TuMV芥菜分离物（LC537522）同处于一个亚组（图3D）；PaMV-GZ分离物与海南百香果PaMV分离物（MK492286）以较高的自展值（Bootstrap"value=100）聚为同一分支（图3E）；PLV-GZ分离物和福建百香果PLV分离物（MK340756）有较近的亲缘关系，而与福建厦门百香果PLV分离物（MK340757）亲缘关系较远（图3F）。

CMV-GZ和PVY-GZ则与不同物种的病毒分离物亲缘关系较近。CMV-GZ和西班牙甜瓜CMV分离物（KX525733）、西班牙番茄CMV分离物（AM183115）、意大利西葫芦CMV分离物（OM867855）聚为一支，有较近的亲缘关系，而与浙江半夏CMV分离物（EU723570）、中国山东矮牵牛CMV分离物（EU414799）亲缘关系较远（图3C）；PVY-GZ和卢旺达辣椒PVY分离物（ON604844）亲缘关系较近，而与贵州烟草PVY分离物亲缘关系较远（图3G）。

2.4""主要病毒的检出率及分布

在贵州省5个百香果主产区采集的153份样品中，全部检测出病毒。不同的病毒分布存在一定差异（表3），EAPV的总检出率最高，达96.08%，其余依次为TeMV（81.70%）、CMV（78.43%）、TuMV（44.44%）、PaMV（26.80%）、PVY（24.84%）和PLV（15.03%）。EAPV、TeMV和CMV分布最为广泛，在所有百香果种植基地均有检出，EAPV的检出率在88.89%～100%之间，TeMV的检出率在77.78%～90.48%之间，CMV的检出率在63.89%～90.48%之间，是贵州省侵染百香果的主要病毒。TuMV在罗甸县未检出，在其余四县的检出率达52.38%～63.89%；PaMV和PLV的分布仅涉及镇宁县和贞丰县；PVY在从江县的检出率最高。镇宁县检测到7种病毒，贞丰县检测到6种病毒，榕江县和从江县检测到5种病毒，罗甸县检测到3种病毒。

2.5""病毒的复合侵染类型

本研究采集的153份样品中，共有8份为单一病毒侵染，分别为罗甸县EAPV样品3份、TeMV样品2份、CMV样品1份和贞丰县PaMV样品2份，其余145份样品均为病毒复合侵染，"复合侵染率为94.77%。共有24种复合侵染类型，其中3～5种复合侵染类型占比较大，仅在7份样品中检测到6种病毒复合侵染类型，均出现在镇宁县和贞丰县，未发现7种病毒复合侵染类型。EAPV+TeMV+CMV的复合侵染组合检出23份，是复合侵染出现最多的类型（图4）。

2.6""多重RT-PCR扩增体系的建立和优化

对侵染贵州百香果的主要病毒EAPV、TeMV"和CMV建立多重RT-PCR扩增体系。设置不同引物浓度进行扩增，结果显示引物加入量为0.5～"2"μL时，3种病毒均能扩增出目的条带，因此为节约成本，选取引物加入量为0.5"μL（反应终浓度为2.0"mmol/L）为最佳引物浓度（图5）。采用优化后的引物浓度对多重RT-PCR体系的退火温度进行筛选，结果显示当退火温度为54"℃时，3种病毒扩增的目的条带清晰无杂带，因此选取54"℃为多重RT-PCR体系的最优退火温度（图6）。采用优化后的引物浓度和退火温度对多重RT-PCR体系的循环次数进行筛选，结果显示当循环次数为35次和40次时，扩增出的条带较清晰，因此为节约循环时间，选取循环次数35次为最佳循环次数（图7）。

综上所述，多重RT-PCR的最佳反应体系为：2×Taq"PCR"MasterMix"Ⅱ"10"μL，10"μmol/L的上下游引物各0.5"μL，cDNA模板0.5"μL，无菌ddH2O补足至20"μL。最佳反应条件为：94"℃预变性3"min；94"℃变性30"s，54"℃退火30"s，72"℃延伸50"s，循环35次；72"℃延伸10"min，4"℃保存。如图8所示，利用优化后的多重RT-PCR体系对12份EAPV、TeMV和CMV复合侵染的样品进行扩增，条带位置与预期大小吻合，检测结果与单一RT-PCR扩增结果一致，因此该体系适用于EAPV、TeMV和CMV的多重检测。

3""讨论

3.1""贵州百香果病毒的复合感染情况

目前，国内外报道能侵染百香果的病毒高达44种[16]，但对其复合侵染的研究较少。谢慧婷等[17]在广西百香果上检测出3种病毒，存在4种复合侵染类型，复合侵染率为34.30%；陈礼浪等[16]在海南百香果上检测出7种病毒，存在32种复合侵染类型，以2～4种病毒复合侵染为主，复合侵染率达78.91%。本研究对贵州百香果主要种植区进行检测，共检测到7种病毒及24种复合侵染类型，3～5种复合侵染类型占比较大，复合侵染率达94.77%。其中EAPV、TeMV和CMV的总检出率高达78.43%～96.08%，在5个百香果主要种植区都有检出，且在11种复合侵染类型中普遍存在，因此，这3种病毒为侵染贵州百香果主要种植区的优势病毒。

此外，本研究首次在百香果上检测出PVY。PVY最早发现于英国的马铃薯上[18]，我国于1950年在烟草上首次发现[19]，该病毒传播方式多样，主要以蚜虫为媒介进行传播，也可以通过汁液摩擦和嫁接等方式传播。PVY的寄主种类繁多，可侵染茄科、豆科和藜科34个属170余种植物，严重影响植物品质及产量[20]。PVY与EAPV、TeMV、PaMV等常侵染百香果的病毒均属于马铃薯Y病毒属（Potyvirus），本研究通过孙琦等[15]已建立的PVY检测体系，在百香果上首次检测出PVY，说明百香果是PVY的新宿主，这为百香果病毒病监测及防控提供了依据，为后续的相关研究提供技术支持。鉴于病毒发生和传播的特性，后续应加强对该病毒的监管与检测，防止其大面积传播。

多重RT-PCR法可同时检测多种病毒，显著提高了检测效率，但目前关于百香果的多重RT-PCR报道较少。本研究前期利用单一RT-PCR法检测出贵州百香果的主要优势病毒为EAPV、TeMV和CMV，这3种病毒在福建[10]、海南[16]、广西[17]等地也被广泛检出，是感染国内百香果的主要病毒。本研究以单一RT-PCR检测为基础，对引物浓度和退火温度等因素进行了筛选优化，建立了这3种病毒的多重RT-PCR体系，为百香果病毒的快速检测提供了技术支持。

病毒侵染百香果后会呈现不同的田间症状，植物的表型症状会随宿主种类、生长状况、生长年龄、感染阶段和外部条件不同而变化，在某些情况下，植物病毒病的症状与病虫害的发生、植物营养缺乏、逆境胁迫和除草剂损害的症状非常相似，难以辨别[21]。本研究中百香果病毒病复合侵染情况严重，存在“一毒多症”和“多毒一症”的情况，仅通过表型观察难以区分，因此在田间防治过程中，遇到疑似病毒感染植株应及时送检，以明确病毒种类，及时防治，从源头上控制该病害的发生及传播。值得注意的是，病毒病在新果园也有发生，说明苗木带病，为了贵州百香果产业的可持续性发展，培育本地脱毒苗并实行严格的种苗检验检疫措施刻不容缓。

3.2""贵州百香果的病毒序列多样性分析

序列分析对病毒溯源有一定参考价值，通过构建进化树发现，EAPV、TeMV、PaMV、PLV、TuMV均与中国各省份的百香果病毒分离物在同一亚组，存在一定的地理聚集性，这说明它们可能具有相同的进化来源，病毒是通过苗木的跨地区引种销售而实现的远距离传播。其中，EAPV-"GZ分离物与台湾百香果分离物（KP114136）一致性最高，与大陆首次检测的百香果EAPV分离物（ON641738）亲缘关系较近，因此合理推测大陆地区发现的EAPV是从台湾引种时传入的，这与谢丽雪等[7]的研究结果一致。TeMV-GZ与广西百香果亲缘关系较近，在本次采样的5个县均有检出，严佳文等[12]和任羽羽等[13]也先后检测到，这说明TeMV-GZ在贵州百香果中已经广泛流行。

将测序结果与NCBI数据库进行比对时发现，CMV和PVY与相应参考序列的相似性较低，经构建进化树可以看出，CMV和PVY分别与西班牙甜瓜和卢旺达辣椒的病毒分离物亲缘关系较近，这说明病毒来源和感染途径复杂，合理推测这也是PVY在贵州被首次发现的原因：（1）病毒的引种携带。据余亚白等[22]报道，国内百香果品种多引自于台湾，而台湾百香果均引自于海外，其中不乏民间个人引进，由于病毒病潜伏期长，缺乏引种检疫意识，病毒可能通过国外引种时传入。（2）病毒的跨物种传播。CMV和PVY的自然寄主类型丰富，传播方式多样，蚜虫等媒介可从通过啃食该病毒的其他宿主将其传播至百香果中。因此在百香果的种植过程中，除了要增强引种检疫意识，还要加强对传播媒介的防治，把进化关系较近的物种在同一地区分开种植，以免造成病毒的大面积播散。

近年来，在农村产业发展的推动下，贵州百香果产业实现了高速发展，现种植规模已跃居全国第三。百香果作为贵州的特色优势水果，对巩固脱贫攻坚成果和深入实施乡村振兴战略具有深刻的意义。本研究对贵州百香果主要种植区的病毒侵染情况进行综合分析，对该产业的健康可持续发展具有一定的参考意义。

参考文献

• 黄爱军，"王莹，"胡笑林."西番莲病毒病研究进展[J]."中国南方果树，"2019，"48（3）："141-146.HUANG"A"J，"WANG"Y，"HU"X"L."Progress"in"research"on"Passiflora"edulis"virus"disease[J]."South"China"Fruits，"2019，"48（3）："141-146."（in"Chinese）
• 王力钧."西番莲综合开发利用研究[J]."热带林业，"2005，"33（2）："25-26.WANG"L"J."Research"on"the"comprehensive"development"and"utilization"of"Passiflora"edulis[J]."Tropical"Forestry，"2005，"33（2）："25-26."（in"Chinese）
• 孙琪，"王亚楠，"张焕，"许玉兰，"蔡年辉，"唐军荣."西番莲组织培养技术研究[J]."种子，"2018，"37（7）："78-81.SUN"Q，"WANG"Y"N，"ZHANG"H，"XU"Y"L，"CAI"N"H，"TANG"J"R."Study"on"the"tissue"culture"technology"of"Passiflora"edulis"Sims[J]."Seed，"2018，"37（7）："78-81."（in"Chinese）
• 陈雪梅，"刘夏蕾，"林标声，"陈小红，"黎英."百香果果皮主要有效成分连续提取工艺[J]."热带作物学报，"2023，"44（2）："405-418.CHEN"X"M，"LIU"X"L，"LIN"B"S，"CHEN"X"H，"LI"Y."Continuousnbsp;extraction"technology"of"main"active"components"of"passion"fruit"peel[J]."Chinese"Journal"of"Tropical"Crops，"2023，"44（2）："405-418."（in"Chinese）

[5]"张中润，"肖丽燕，"冯红玉，"程子硕，"高玲."海南百香果病虫害种类调查鉴定及其发生危害[J]."热带作物学报，"2022，"43（10）："2114-2121.ZHANG"Z"R，"XIAO"L"Y，"FENG"H"Y，"CHENG"Z"S，"GAO"L."Investigation"and"identification"of"diseases"and"pests"of"passion"fruit"in"Hainan"and"the"damages[J]."Chinese"Journal"of"Tropical"Crops，"2022，"43（10）："2114-2121."（in"Chinese）

[6]"罗金水，"周知恩，"王隆燊，"陈振东，"吴祖建，"林荣耀."西番莲病毒病的发生与防控[J]."东南园艺，"2019，"7（6）："36-40.LUO"J"S，"ZHOU"Z"E，"WANG"L"S，"CHEN"Z"D，"WU"Z"J，"LIN"R"Y."Occurrence"and"prevention"and"control"suggestion"of"virus"diseases"of"passion"fruit[J]."Southeastern"Horticulture，"2019，"7（6）："36-40."（in"Chinese）

• 谢丽雪，"张立杰，"张小艳，"郑姗，"李韬."福建西番莲上首次检出东亚西番莲病毒[J]."园艺学报，"2018，"45（8）："1587-1594.XIE"L"X，"ZHANG"L"J，"ZHANG"X"Y，"ZHENG"S，"LI"T."First"report"of"East"Asian"Passiflora"virus"infecting"Passiflora"edulis"in"Fujian，"China[J]."Acta"Horticulturae"Sinica，"2018，"45（8）："1587-1594."（in"Chinese）
• 谢丽雪，"张小艳，"郑姗，"张立杰，"李韬."侵染西番莲的夜来香花叶病毒的分子鉴定及特异性检测[J]."中国农业科学，"2017，"50（24）："4725-4734.XIE"L"X，"ZHANG"X"Y，"ZHENG"S，"ZHANG"L"J，"LI"T."Molecular"identification"and"specific"detection"of"Telosma"mosaic"virus"infecting"passion"fruit[J]."Scientia"Agricultura"Sinica，"2017，"50（24）："4725-4734."（in"Chinese）
• 焦楠，"朱宁，"程春振，"林玉玲，"李汉生，"陈发兴，"赖钟雄."西番莲TeMV和CMV双重RT-PCR检测体系的建立及应用[J]."果树学报，"2019，"36（7）："947-953.JIAO"N，"ZHU"N，"CHENG"C"Z，"LIN"Y"L，"LI"H"S，"CHEN"F"X，"LAI"Z"X."Establishment"and"application"of"the"Telosma"mosaic"virus"and"Cucumber"mosaic"virus"duplex"RT-PCR"system"in"passionfruit[J]."Journal"of"Fruit"Science，"2019，"36（7）："947-953."（in"Chinese）
• 焦楠."西番莲快繁体系建立及脱毒技术研究[D]."福州："福建农林大学，"2019.JIAO"N."Establishment"of"a"fast"breeding"system"and"detoxification"technology"for"Passiflora"edulis[D]."Fuzhou："Fujian"Agriculture"and"Forestry"University，"2019."（in"Chinese）
• CARDONA"D，"HIGUITA"M，"POSADA"J，"GALLO"Y，"MARIN"M，"GUTIERREZ"P."Viruses"infecting"purple"passion"fruit"（Passiflora"edulis"f."edulis）"in"southwestern"Antioquia，"Colombia[J]."Archives"of"Phytopathology"and"Plant"Protection，"2022，"55（12）："1394-1409.
• 严佳文，"袁启凤，"解璞，"王立娟，"马玉华，"王正媛."利用小RNA测序技术检测贵州西番莲病毒[J]."热带作物学报，"2019，"40（8）："1577-1584.YAN"J"W，"YUAN"Q"F，"XIE"P，"WANG"L"J，"MA"Y"H，"WANG"Z"Y."Identification"of"viruses"infecting"Passiflora"edulis"in"Guizhou"province"by"small"RNA"sequencing[J]."Chinese"Journal"of"Tropical"Crops，"2019，"40（8）："1577-1584."（in"Chinese）
• 任羽羽，"王立娟，"陈楠，"袁启凤，"马玉华."三种百香果病毒在贵州的发生分布[J]."中国南方果树，"2022，"51（3）："79-"82.REN"Y"Y，"WANG"L"J，"CHEN"N，"YUAN"Q"F，"MA"Y"H."Distribution"of"the"occurrence"of"three"Passiflora"edulis"viruses"in"Guizhou[J]."South"China"Fruits，"2022，"51（3）："79-82."（in"Chinese）
• 宋若楠，"侯永翔，"崔梦迪，"冯岩，"韩群鑫，"饶雪琴."广东百香果病毒的检测[J]."仲恺农业工程学院学报，"2020，"33（1）："11-15.SONG"R"N，"HOU"Y"X，"CUI"M"D，"FENG"Y，"HAN"Q"X，"RAO"X"Q."Detection"of"virus"infecting"passion"fruit"in"Guangdong[J]."Journal"of"Zhongkai"University"of"Agriculture"and"Engineering，"2020，"33（1）："11-15."（in"Chinese）
• 孙琦，"张春庆."PVYN与PVYO病毒RT-PCR快速检测体系研究[J]."中国农业科学，"2005，"38（1）："213-216.SUN"Q，"ZHANG"C"Q."Studies"on"the"methods"of"detecting"PVYN"and"PVYO"by"RT-PCR[J]."Scientia"Agricultura"Sinica"2005，"38（1）："213-216."（in"Chinese）
• 陈礼浪，"杨天章，"蔡儒平，"林小漫，"邓南康，"车海彦，"林雅婷，"孔祥义."海南西番莲主要病毒种类的分子检测与鉴定[J]."园艺学报，"2022，"49（8）："1785-1794.CHEN"L"L，"YANG"T"Z，"CAI"R"P，"LIN"X"M，"DENG"N"K，"CHE"H"Y，"LIN"Y"T，"KONG"X"Y."Molecular"detection"and"identification"of"viruses"from"Passiflora"edulis"in"Hainan[J]."Acta"Horticulturae"Sinica，"2022，"49（8）："1785-1794."（in"Chinese）
• 谢慧婷，"李战彪，"崔丽贤，"秦碧霞，"刘丽辉，"林珊宇，"陈锦清，"蔡健和."广西局地西番莲病毒病的病原鉴定及优势病毒分析[J]."植物病理学报，"2020，"50（4）："387-393.XIE"H"T，"LI"Z"B，"CUI"L"X，"QIN"B"X，"LIU"L"H，"LIN"S"Y，"CHEN"J"Q，"CAI"J"H."Identification"of"pathogens"and"analysis"of"the"dominant"viruses"of"passion"fruit"virus"disease"in"some"areas"of"Guangxi[J]."Acta"Phytopathologica"Sinice，"2020，"50（4）："387-393."（in"Chinese）
• SMITH"K"M."On"the"composite"nature"of"certain"potato"virus"diseases"of"the"mosaic"group"as"revealed"by"the"use"of"plant"indicators"and"selective"methods"of"transmission[J]."Proceedings"of"the"Royal"Society"of"London，"1931，"109（762）："251-267.
• 张诺妮，"曹洋，"梅运鹏，"韩猛，"姚峰，"何文勤，"杨鹏，"杨章明，"王阳，"安德荣."烟草马铃薯Y病毒病发生规律及生物防治研究进展[J]."北方农业学报，"2022，"50（2）："110-116.ZHANG"N"N，"CAO"Y，"MEI"Y"P，"HAN"M，"YAO"F，"HE"W"Q，"YANG"P，"YANG"Z"M，"WANG"Y，"AN"D"R."Research"progress"on"the"occurrence"pattern"and"biological"control"of"tobacco"potato"virus"Y[J]."Journal"of"Northern"Agriculture，"2022，"50（2）："110-116."（in"Chinese）
• 杨森."马铃薯Y病毒病检测方法及防治策略研究进展[J]."世界农药，"2022，"44（10）："15-20.YANG"S."Research"progress"on"detection"methods"and"control"strategies"of"potato"Y"virus"disease[J]."World"Pesticide，"2022，"44（10）："15-20."（in"Chinese）
• 阎世江，"郭建恩."植物病毒病的防治研究进展[J]."天津农林科技，"2022（6）："26-32.YAN"S"J，"GUO"J"E."Advances"in"research"on"the"control"of"plant"viral"diseases[J]."Science"and"Technology"of"Tianjin"Agriculture"and"Forestry，"2022（6）："26-32."（in"Chinese）
• 余亚白，"陈源，"王琦，"谢鸿根，"赖呈纯."台湾果树品种的引种、改良与种植[J]."福建农业科技，"2008，"5（1）："92-94.YU"Y"B，"CHEN"Y，"WANG"Q，"XIE"H"G，"LAI"C"C."Introduction，"improvement"and"planting"of"fruit"tree"varieties"in"Taiwan[J]."Fujian"Agricultural"Science"and"Technology，"2008，"5（1）："92-94."（in"Chinese）