新疆哈密市2019 年家畜包虫病的监测与分析

段进刚 ，陈建豪，张国新，杨 帆，杨夷平，张志新，马春江

(新疆哈密市动物疫病预防控制中心，新疆 哈密 839000)

棘球蚴病(Echinococcosis)也叫包虫病(Hydatidosis)，是棘球绦虫的幼虫寄生于牛、羊、猪及人等多种哺乳动物内脏器官的一种重要的人兽共患寄生虫病，是世界上重要的公共卫生问题之一[1]。棘球绦虫的幼虫主要寄生于肝脏，其次是肺脏，成虫寄生于犬科动物的小肠中，绵羊对细粒棘球蚴较敏感，病死率较高，严重感染者表现为消瘦、被毛逆立、脱毛、咳嗽，倒地不起[2]；牛严重感染棘球蚴时，表现为消瘦，衰弱，呼吸困难或轻度咳嗽，产奶量下降[3]；各种动物都可因包囊破裂导致严重的过敏反应而引起突然死亡[4]。包虫病分布于世界各地，全世界每年有成千上万的人因患包虫病而丧失劳动力和生命。在我国，包虫病主要流行于西北、华北及东北广大的牧区，其中以新疆、青海、西藏、甘肃等地最严重[5]。OIE 将本病列为B 类动物疫病，我国将其列为二类动物疫病[6]。

哈密市2019 年家畜年末存栏数牛9.2 万头，羊85.03 万只，传统养殖模式仍占一定比重，动物疫病防治形势依然严峻，同时，随着哈密市畜牧业生产不断转型升级，养殖密度不断增加，动物疫病风险也随之加大。为全面掌握哈密市家畜包虫病感染情况，科学评估包虫病流行趋势以及高风险区域的发病情况，及时杜绝疫情隐患，本研究通过对牛羊进行剖检、采用间接ELISA 试验对羊进行包虫病抗体水平检测和应用抗原ELISA 检测犬粪，对全市包虫病的感染情况进行综合评估与分析，为今后包虫病的防控工作提供最直接的参考依据。

1 材料与方法

1.1 样品采集

2019 年全市共剖检牛羊1 390 头只，检测羊血清311 份，检测犬粪342 份。

1.1.1 样品制备

羊血清样品的处理 将采集的羊血液样品在3 000 r/min 条件下离心3～5 min，取血清2 mL 放入灭菌离心管中，-20 ℃保存待检。

犬粪便样品的处理 取约 1 g 粪便，置于 15 mL 离心管中，加入含 0. 3% Tween-20 的PBS 5 mL，充分混匀，置于冰水混合物中超声3～4 次，经3 000×g(离心半径10 cm)离心10 min，取上清，置-20 ℃保存待检。

1.2 试剂及仪器设备

1.2.1 包虫病检测试剂

羊棘球蚴(包虫)病ELISA 抗体检测试剂盒(批号为 20190308)和细粒棘球绦虫犬粪抗原ELISA 检测试剂盒(批号：20190320)均购自重庆澳龙生物制品有限公司。

1.2.2 仪器设备

高速冷冻离心机购自北京六一仪器厂；移液器为德国eqqendorf 公司产品；酶标仪为318MC 型全自动酶标分析仪，购自上海京工仪器公司。

1.3 检测方法及结果判定

1.3.1 检测方法

按照羊棘球蚴(包虫)病ELISA 抗体检测试剂盒和细粒棘球绦虫犬粪抗原ELISA 检测试剂盒说明书进行操作。

1.3.2 结果判定

羊棘球蚴(包虫)病 ELISA 抗体检测结果判定：标准阳性对照孔平均OD450 nm 值≥0. 60，标准阴性对照孔OD450 nm 值≤0. 30 试验成立; 检测样品OD450 nm 值＞0. 60 为抗体阳性， 检测样品OD450 nm值介于0. 30 与0. 60 之间为抗体弱阳性，检测样品OD450 nm 值≤0. 30 为抗体阴性。

细粒棘球绦虫犬粪抗原ELISA 检测结果判定： 样品OD450 nm 值＞阴性对照OD450 nm 平均值×2.1的判定为阳性；样品OD450 nm 值≤阴性对照OD450 nm 平均值×2.1 的判定为阴性。

2 结果与分析

2.1 牛羊包虫病感染情况

采用眼观、触摸、剖检三种方式检验家畜肝脏、肺脏包囊感染情况。全市共剖检检查屠宰场牛470 头，阳性17 头，阳性率3.62%，同比升高2.31%(1.31%)；剖检羊920 只，阳性48 只，阳性率5.22%，同比升高2.48%(2.74%)。 伊州区剖检 618 头只，其中牛 232 头，阳性 7 头，阳性率 3.02%，同比升高 2.37%(0.65%)；羊386 只，阳性23 只，阳性率5.96%，同比升高3.72%(2.24%)。巴里坤县剖检468 头只，其中牛138 头，阳性9 头，阳性率6.52%，同比升高2.14%(4.04%)；羊330 只，阳性19 只，阳性率5.76%，同比升高2.14%(3.62%)。 伊吾县剖检304 头只，其中牛100 头，阳性1 头，阳性率1.00%，同比升高1%(0%)；羊204 只，阳性6 只，阳性率2.94%，同比降低0.45%(3.39%)(详见表1)。

表1 牛羊包虫病感染情况

2.2 羊血清抗体检测情况

采用羊棘球蚴(包虫)病 ELISA 方法检测羊血清311 份。其中，伊州区涉及2 个乡镇、2 个行政村，共采集羊血清93 份，感染抗体阳性率为2.15%；巴里坤县涉及5 个乡镇、5 个行政村，共采集羊血清170 份，感染抗体阳性率为4.71%； 伊吾县涉及3 个乡镇、3 个行政村， 共采集羊血清48 份， 感染抗体阳性率为4.17%(见表 2)。

表2 羊血清抗体检测情况

2.3 犬粪抗原ELISA 检测情况

采用细粒棘球绦虫犬粪抗原ELISA 检测方法检测犬粪342 份。 其中， 检测伊州区涉及3 个乡镇、10个行政村，共采集犬粪样品203 份，阳性率为0.99%；巴里坤县涉及5 个乡镇、7 个行政村，共采集犬粪样品94 份，阳性率为2.13%；伊吾县涉及3 个乡镇、3 个行政村，共采集犬粪样品45 份，阳性率为2.22%(见表3)。

表3 犬粪抗原ELISA 检测情况

2.4 牛羊包虫病调查结果分析

结果显示(图1)，与2018 年相比，2019 年全市牛羊包虫病感染率整体呈上升趋势，牛包虫病感染率升高2.31 个百分点，羊包虫病感染率升高2.48 个百分点，牛羊包虫病的防控形势依然很严峻，需进一步加大防控力度。

剖检调查结果显示(图2)，伊州区、巴里坤县、伊吾县家畜均存在包虫病病例，羊感染率明显高于牛，可能与羊舍饲程度低、放牧比例大有关。 伊州区和巴里坤县羊包虫病感染率高于伊吾县，可能与伊州区、巴里坤县羊放牧比例大、放牧周期长、牧羊犬使用广泛有关。

图1 牛羊包虫病感染率

图2 2019 年哈密市牛羊包虫病感染情况

2.5 羊血清感染抗体检测结果分析

羊棘球蚴间接ELISA 检测结果显示(图3)，巴里坤县、伊吾县羊包虫病感染抗体阳性率均高于伊州区，说明牧区和半农半牧区感染包虫病的风险更大，这与牧区和半农半牧区养殖方式、饲养犬类和野生动物狼、狐狸的活动相关。

2.6 犬粪抗原ELISA 检测结果分析

犬粪抗原ELISA 检测结果显示(图3)，犬粪抗原阳性率与羊包虫病感染抗体阳性率呈正相关，巴里坤县、伊吾县犬粪抗原阳性率均高于伊州区，说明牧区和半农半牧区感染包虫病的风险更大，提示与饲养犬类和野生动物狼、狐狸的活动相关。

3 讨 论

图3 包虫病感染情况

此次调查共剖检牛470 头，阳性率3.62%，羊920 只，阳性率5.22%；检测羊血清311 份，阳性率为3.11%；检测犬粪342 份，阳性率为1.46%，与2018 年相比，2019 年全市牛羊包虫病感染率整体呈上升趋势，分析原因一是2019 年开始，哈密市对当年新生羔羊包虫病疫苗免疫和补免工作不到位，饲养管理工作不科学；二是牧区对于“犬犬投药，月月驱虫”的包虫病防控原则贯彻不彻底，对偏远山区可能疏于防治；三是区县部分乡镇存在对包虫病防控工作不够重视、宣传力度不足、对犬管理不严及防控经费不足等问题；四是近年来国家对野生动物的保护，导致狼、狐狸和旱獭等终末宿主大量繁殖出没，排泄物污染的草场被牛羊啃食而感染。

本试验结果提示，哈密地区2019 年牛羊包虫病的感染率相比2018 年都有所升高，牛羊包虫病的防控形势依然很严峻，必须尽快采取相应的措施。

对犬定期进行驱虫，加强犬的管理，不让犬吃生的家畜内脏，做到“月月驱虫，犬犬投药”是有效控制包虫病的措施[8]；切断传播途径，减少养犬数量，牧区要少养犬，对犬粪进行收集并深埋处理，防止棘球蚴绦虫卵污染环境[9]；规范屠宰检疫，禁止屠宰场买卖病变脏器，限制屠宰场养犬，做好监督管理工作[10]；加大宣传教育力度，在公共场所和农牧区张贴防治包虫病宣传画，使农牧民及广大居民知道包虫病的生活史和传播途径及防治方法，防止感染；抓好培训工作，全面加强检疫监管，重点加强对牛、羊、犬养殖场(户)开展包虫病防控知识、防控技术等知识培训，有效提高哈密市包虫病防治能力；预防包虫病最有效的措施是接种疫苗，疫苗可以诱导机体产生特异性抗体抵抗包虫的感染，可以有效切断包虫的传播，从而达到防控包虫病的目的[11]；应用灵敏度高、特异性强的检测方法对进行包虫病动态监测，从而为包虫病的预防和控制提供更加科学的依据。