山东日照市养猪场（户）伪狂犬病免疫效果监测

韩永平 韩 勇 刘玉洁

1.山东省日照市五莲县畜牧兽医管理服务中心中至畜牧兽医站，山东日照 262300；2.山东省日照市畜牧兽医管理服务中心，山东日照 276800

猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒所引起的猪的急性传染病，该病流行特点是暴发性，且新生仔猪、断奶仔猪、成年猪等不同阶段、不同类型的猪都易感[1]。伪狂犬病毒是垂直传播疫病，不仅引起母猪繁殖障碍，还能引起仔猪大量死亡，严重危害畜牧业。伪狂犬病是需要养殖场（户）防控净化的一种主要疫病，近年来越来越受到养殖场（户）重视。为做好猪伪狂犬病的防控，山东省日照市畜牧兽医管理服务中心结合春季防疫，抽检养殖场（户）8 个，了解猪群伪狂犬病抗体水平，为科学防控猪伪狂犬病提供技术支撑。

1 材料与方法

1.1 试验地点、方法

2019年5月10-20日，本试验在山东省日照市畜牧兽医管理服务中心实验室开展，方法采用猪伪狂犬病抗体ELISA。

1.2 血清样品

对全市8 家养猪场（户）进行抽样检测，共抽查280 份血清。每个猪场采集全血不少于5 mL，分离的血清不少于1 mL。按照群内免疫合格率90%、置信水平95%、可接受误差10%，每个场点采集样品35 份。2019年5月抽检8 家，共抽查280 份血清，具体抽样情况见表1。

表1 日照市养猪场（户）伪狂犬病监测抽样情况

1.3 检测试剂

猪伪狂犬抗体ELISA 检测试剂盒购自武汉科前生物公司，批号为190313。

1.4 仪器设备

酶标仪为美国MD 生产，型号为SpectraMax 190；恒温培养箱为上海迅播；移液器为百得公司生产。

1.5 猪伪狂犬抗体的检测

每孔加入100 μL 样品，贴上膜后37 ℃作用45 min，洗板机洗剂5 次；加入酶标物，37 ℃作用20 min，洗板机洗剂5 次，加入底物反应10 min；最后加入终止液，630 nm 测OD 值。

结果判定：阴性对照孔－阳性对照孔的OD 值＞0.3 结果成立。S 为样品OD 值，N 为阳性对照孔的OD 值。样品OD 值/阳性对照孔的OD 值≤0.3 为阳性，＞0.3 判为阴性。

2 结果与分析

检测结果显示（表2）：血清检测280 份，其中免疫合格（判定结果为阳性）244 份，合格率87.1%，可以看出猪伪狂犬病抗体总体水平＞80%。

表2 日照市养猪场（户）伪狂犬病抗体检测

3 讨 论

3.1 检测总体情况

全市共抽检场（户）8 个，其中种猪场1 个，规模场5 个，养殖户2 个，280 份样品，244 份合格，合格率87.1%，检测表明日照市猪伪狂犬病抗体总体水平较好。

3.2 猪伪狂犬病风险评估

根据检测结果，日照市猪伪狂犬病抗体水平高达87.1%，发生猪伪狂犬病的风险较低。种猪场和规模场免疫效果较好，达到90%以上，能抵抗病毒的入侵。但一般散养户由于免疫次数较少，合格率仅有72.9%，存在一定的疫情风险。

3.3 抽样方法的选择

本次试验抽样方法为先抽取场点，在场点内再抽取个体的抽样方式开展监测采样。但是由于资金和人力的限制，养殖场抽样数量较少，不能最大限度地反映全市猪伪狂犬病免疫抗体的水平。