原发性肝癌患者术后3年生存率与FHIT基因表达的关系

赵鹏伟 黄建钊 柳严 张佳伟 刘延 刘江伟

目前，手术是治疗原发性肝癌的重要手段，但术后复发率仍较高，对预后影响非常大。已有研究证实手术治疗后癌灶复发、转移是影响恶性肿瘤患者生存期的重要因素[1]。近年来，有研究指出脆性组氨酸三联体(FHIT)基因对细胞有丝分裂、增殖存在抑制作用，可促进肿瘤细胞凋亡[2]。然而，目前关于该基因对患者远期生存率影响的报道较少。鉴于此，本院纳入180例原发性肝癌患者为研究对象，分析患者术后3年生存率与FHIT基因表达的关系，现报道如下。

资料与方法

一、纳入与排除标准

纳入标准：(1)成年患者；(2)符合中华人民共和国卫生部[3]制定的《原发性肝癌诊疗规范(2011年版)》中的诊断标准，经临床病理检验证实；(3)无麻醉、手术禁忌，均行原发性肝癌根治术；(4)承诺配合随访；(5)意识清醒，无认知障碍；(6)知情同意。排除标准：(1)保守治疗；(2)肾、心、肺、脑等脏器严重损害；(3)合并其他恶性肿瘤；(4)机体全身感染。

二、一般资料

选取我院2012年5月—2015年5月收治的原发性肝癌患者180例，其中男性98例，女性82例，年龄26～75岁，平均(52.84±16.52)岁；临床分期：Ⅰ～Ⅱ期72例、Ⅲ～Ⅳ期108例；分化程度：低分化47例、中分化61例、高分化72例；肿瘤部位：右半肝76例、左半肝89例、左右肝交界部位15例；肿瘤大小2～8 cm，平均(4.82±1.96)cm；病理分型：肝细胞型155例、胆管细胞型18例、混合型7例；肿瘤数目：单发95例，多发85例。

三、方法

通过入户或电话随访3年，记录患者随访期间的生存、死亡情况，并据此分为生存组、死亡组。收集两组临床特征，包括性别、年龄、分化程度、临床分期、包膜、肿瘤部位、病理分型、肝硬化、肿瘤大小、肿瘤数目、家族史、血管侵犯、淋巴结转移、FHIT基因表达，分析患者术后3年生存率与临床特征的关系。绘制ROC曲线分析FHIT基因表达对患者3年内生存的预测价值，采用Cox回归性分析FHIT基因表达与原发性肝癌术后3年生存率的关系。

四、FHIT基因表达检测

采用组织芯片免疫组化染色法测定，取癌肿组织制备组织芯片，经脱蜡、修复抗原、室温封闭、加一抗、置入冰箱过夜、复温、孵育、DAB显色处理后，终止反应，复染，返蓝，脱水，封片。FHIT蛋白为颗粒状，呈棕黄色。随机选取5个视野给予定量分析，检测FHIT蛋白阳性颗粒平均灰度值。灰度值与物质含量为反比例关系，即灰度值越小提示物质含量越高。

五、统计学方法

利用SPSS 20.0统计软件对患者的临床资料进行分析，计量资料用(±s)表示，采用t检验，计数资料用(%)表示，采用χ2检验，绘制ROC曲线分析FHIT基因表达对患者3年内生存的预测价值，采用Cox回归性分析FHIT基因表达与原发性肝癌术后3年生存率的关系，P<0.05为差异有统计学意义。

结 果

一、180例原发性肝癌患者3年内生存、死亡情况

随访3年，在180例患者中，有118例生存，占65.56%，有62例死亡，占34.44%，死亡原因为病灶远处转移与复发。其中1年、2年、3年生存率分别为88.33%(159/180)、76.11%(137/180)、65.56%(118/180)。

二、生存组、死亡组的临床特征比较

生存组高分化、肿瘤Ⅰ～Ⅱ期、肿瘤<5 cm、无淋巴结转移占比分别为51.69%、50.85%、65.25%、74.58%，高于死亡组的17.74%、19.35%、27.42%、32.26%，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 生存组、死亡组的临床特征比较

三、FHIT基因表达对原发性肝癌患者3年内生存的预测价值

FHIT基因灰度值预测原发性肝癌患者3年内生存的曲线下面积为0.736(标准误=0.041，P<0.001，95%CI=0.655～0.817)，最佳截断值为35.489，敏感度为0.714，特异度为0.691。以FHIT基因灰度值<35.489时生存可能性越高，ROC曲线见图1。

图1 FHIT基因表达预测原发性肝癌患者3年内生存的ROC曲线

四、FHIT基因表达及其他病理特征与术后3年生存率的关系

以表1中的各项临床特征作为自变量，以随访3年是否生存为因变量，利用Cox回归性分析对各变量进行赋值，提示FHIT基因表达是原发性肝癌术后3年内生存率的影响因素(P<0.05)。此外，分化程度、临床分期、肿瘤大小、淋巴结转移也与术后3年内生存率相关(P<0.05)，见表2。

表2 FHIT基因表达及其他病理特征 与术后3年生存率的关系

讨 论

近年来，有研究提示恶性肿瘤患者存在FHIT基因表达丢失、下调现象，这表明该基因可能对恶性肿瘤细胞有抑制作用，但具体机制尚未彻底明确[4]。本研究以原发性肝癌患者为研究对象，发现生存组的FHIT基因灰度值低于死亡组，这提示生存组患者的FHIT基因表达水平高于死亡组。FHIT基因蛋白是三联组氨酸蛋白家族中的一员，它在正常人的组织中均存在表达，但在呼吸道癌、乳腺癌、消化道癌中表达均有缺失。刘学智等[5]认为FHIT基因可通过与其底物结合发挥抑癌作用，并推测其底物复合物也许为信号物质，这可能是该基因抑癌机制之一。徐又先等[6]研究提示FHIT基因的RNA、DNA与蛋白存在密切关联，该基因缺失可能导致上述某一途径启动，从而促进恶性肿瘤病情进展。这提示FHIT基因表达缺失与恶性肿瘤进程相关，与本研究结论基本符合。

本研究创新之处在于通过绘制ROC曲线，发现FHIT基因灰度值对原发性肝癌3年内生存率的预测存在一定价值，当FHIT基因灰度值<35.489时，患者生存可能性越高。此外，Cox回归性分析提示FHIT基因表达是原发性肝癌术后3年内生存率的危险因素，进一步证实FHIT基因表达对患者术后3年内生存情况有显著影响。笔者结合实践过程，推测该基因表达对原发性肝癌预后的影响机制可能如下：(1)它可发挥Ap3A水解酶功能，而Ap3A能使蛋白激酶活性增强，当FHIT基因表达降低后，Ap3A增高，从而促进肿瘤进展。(2)FHIT能对mRNA类似物产生影响，从而致其脱帽功能削弱，导致病情恶化。本次研究还发现分化程度、临床分期、肿瘤大小、淋巴结转移也与术后3年内生存率存在关联，与陈兵等[7-8]研究结论基本相符。

综上，本研究证实FHIT基因表达对原发性肝癌术后3年内生存率有一定预测价值，且它与分化程度、临床分期、肿瘤大小、淋巴结转移均为影响患者术后3年内生存率的危险因素，临床需对此引起重视。除此之外，本研究也存在局限性，如纳入样本量较少，未来将扩大样本量对此进行更深入分析。