蒲公英提取物的制备及质量检查

吴 雪，范艳美，杨 镰，李启照，姚 凯

(安徽新华学院，安徽 合肥 230088)

蒲公英为多年生草本菊科植物，气微，味微苦，具有很高的药用价值，能清热解毒，利尿散结，还可以治疗急性乳腺炎，淋巴腺炎，疔毒疮肿，急性结膜炎，感冒发热急性扁桃体炎，急性支气管炎，胃炎，肝炎，胆囊炎，尿路感染等[1]。

蒲公英含有多种化学成分，主要包括黄酮类，萜类，酚酸类，萜类，多糖类，植物甾醇类[2-3]。中国药典2015年版一部主要以咖啡酸含量作为质控指标[4]。咖啡啡酸，又名3,4-二羟基肉桂酸，属于酚酸类化合物，具有收缩增固微血管，促进凝血因子功能，升高白血球及血小板之功效，用于白细胞、血小板减少症的治疗，此外还具有抗氧化、抗肿瘤和脑保护等多种药理作用[5-6]。目前常用高效液相色谱法测定咖啡酸的含量。

1 仪器与材料

Agilent 1200高效液相色谱仪，Agilent HC-C18(4.6×250mm，5μm)色谱柱，FA2004电子天平(上海越平科学仪器有限公司)。甲酸，95%乙醇为分析纯。甲醇为色谱纯。咖啡酸对照品(中国药品生物制品检定所，批号为110885-200102)。蒲公英(安徽产)。

2 方法与结果

2.1 蒲公英提取物的制备

称取蒲公英粗粉50g，配置500mL 60%乙醇溶液(料液比1∶10)，用甲酸调节pH值3～5，将二者置于闪式提取器罐中，闪式提取两次，每次2min。抽滤，滤液减压蒸馏浓缩得浸膏，用丙酮萃取两次，萃取液脱溶，置于真空干燥箱干燥，制得蒲公英提取物。

2.2 咖啡酸对照品的制备

精密称取咖啡酸对照品13.62mg,置100mL容量瓶中,用甲醇定容到刻度，溶解摇匀，得咖啡酸对照品溶液(浓度0.1362mg/mL)。

2.3 供试品溶液的制备

精密称取上述方法制备的蒲公英提取物1.0g,置100mL容量瓶中,用甲醇定容到刻度，摇匀，过滤，取续滤液，得供试品溶液备用。

2.4 色谱条件

色谱柱：Agilent HC-C18(4.6×250mm，5μm)；流动相：甲醇-0.1%磷酸水溶液 (25∶ 75)；柱温30℃，流速1.0mL/min，检测波长323mm。咖啡酸对照品和样品色谱图见图1。

2.5 线性关系考察

精密量取咖啡酸对照品溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0mL,分别置于50mL容量瓶中，用甲醇定容到刻度，得6个不同浓度的对照品溶液，分别进样20μL测定峰面积。以峰面积纵坐标浓度为横坐标绘制标准曲线，得回归方程y=389.91x+268.56(r2=0.9989)，表明咖啡酸在0.0027至0.0163mg/mL浓度范围内线性关系良好。

2.6 精密度试验

精密吸取咖啡酸对照品溶液20μL，连续进样6次，算得峰面积的RSD为1.34%，表明仪器精密度良好。

2.7 稳定性考察

取同一样品供试品溶液，按上述方法分别于不同时间(1h,2h,3h,4h,5h,6h,8h)测定峰面积，RSD为0.97%，显示在8h内稳定。结果表明供试品稳定性好。

2.8 重现性试验

称取同一批蒲公英提取物样品5份，每份1g，按供试品溶液制备方法进行平行实验，每份进样20μL，测定峰面积，计算咖啡酸的含量。RSD为1.36%，表明本方法的重现性良好。

2.9 加样回收实验

精密称取咖啡算对照品6.0mg,分别加入6份已知含量的1克的样品中, 按供试品溶液制备方法制备，每份进样20μL，测定峰面积，计算回收率。 计算RSD为1.58%，表明本方法回收率较好。

图1 咖啡酸对照品(A)和样品(B)色谱图

3 样品含量测定

用上述方法对蒲公英提取物中咖啡酸进行含量测定，得蒲公英提取物中咖啡酸含量是4.599mg/g。

4 讨论

蒲公英提取物的制备方法比较多，本文通过查阅相关文献进行比较总结，选择了合适的提取溶剂，料液比，采用新型的闪式提取法制备蒲公英提取物，并测定其中主要成分咖啡酸的含量。结果表明，此法操作简单快速，高效节能，质量检查符合要求，可作为制备蒲公英提取物的一种方法。