血清PAPP-A、AFP及uE3联合检测预测子痫前期的临床价值*

张梅山

青海省海西州人民医院妇产科(海西817000)

子痫前期(Preeclampsia，PE)是指怀孕前血压正常的孕妇在妊娠20周以后出现高血压、蛋白尿[1]。临床流行病学研究显示，子痫前期发病率在所有妊娠中约占2.3%～7.6%[2]，是临床严重威胁母婴健康的妊娠期特有疾病。临床研究显示病理变化主要为全身小动脉痉挛、血液浓缩、血液高凝等，会增加母婴并发症的风险，甚至危及母婴生命安全。目前，子痫前期的发病原因及确切机制尚不完全明确，无有效的预防方法，部分患者出现高血压和蛋白尿时，已发展为重度。因此，子痫前期的早期筛查、诊断和治疗对母婴预后具有重要意义。由于子痫前期缺乏有效的早期预测手段，因而往往在患者出现临床症状后才开始进行治疗，从而增加了孕产妇死亡风险。故，探寻子痫前期早期诊断方法是近年来子痫前期研究的热点[3-4]。已有文献报道，子痫前期患者血清多种妊娠相关因子呈现差异表达，如血浆蛋白(PAPP-A)、甲胎蛋白(AFP)、游离雌三醇(uE3)及人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)等[5]，这些差异表达的血清蛋白因子为早期预测子痫前期提供了可行性。本研究采用病例对照研究的方法，应用酶联免疫吸附法检测子痫前期患者及正常孕产妇血清PAPP-A、AFP及uE3水平，根据贝叶斯定理计算联合检测上述指标预测子痫前期的临床价值。

资料与方法

1 一般资料 选择2015年2月至2017年2月我院收治的子痫前期患者38例(轻度子痫前期21例，重度17例)同期正常妊娠者40例作为研究对象。正常妊娠组年龄24～33岁，平均年龄(27.6±6.4)岁，平均孕周(39.1±1.2)周，平均新生儿体重(3.4±0.4)kg；子痫前期组年龄25～34岁，平均年龄(28.9±5.1)岁，平均孕周(39.2±1.1)周，平均新生儿体重(3.3±0.3) kg。诊断标准：子痫前期的诊断参考《妇产科学》第8版为标准：妊娠20周后出现收缩压≥140 mmHg和(或)舒张压≥90 mmHg伴蛋白尿≥0.3 g/24h或随机尿蛋白≥(+)[6]。纳入标准：符合子痫前期的诊断标准；年龄24～34岁；所有患者均签署知情同意书，且该实验方法经过医院伦理委员会批准。

2 实验方法

2.1 仪器与设备：全自动生化分析仪(购自美国贝克库尔特公司)，全自动血细胞分析仪(购自美国雅培公司)；台式低速离心机(购自北京白洋离心机有限责任公司)血清PAPP-A、AFP及uE3酶联免疫吸附试剂盒(购自上海酶联生物科技有限公司)。

2.2 血清PAPP-A、AFP及uE3检测：两组人群于孕20周清晨空腹抽取外周肘静脉血5 ml，静置，1000 r/min离心10 min后分离血清，分装入高压处理后的1.5 ml EP管后置于-70℃冰箱保存以备批量待检。采用ELISA方法检测血清中血清PAPP-A、AFP及uE3蛋白浓度，检测方法根据试剂盒操作说明进行。

结 果

1 子痫前期患者与对照组孕产妇血清学指标水平比较 见表1，图1。重度子痫前期、轻度子痫前期患者及健康对照组孕产妇血清PAPP-A、AFP及uE3水平见表1，对照组上述指标显著高于子痫前期组，差异有统计学意义(P<0.05)；且轻度子痫前期组显著高于重度子痫前期组，差异有统计学意义(P<0.05)。

表1 子痫前期患者与对照组孕产妇血清学指标水平比较

注：与重度及轻度子痫前期比较，*P<0.05;与重度子痫前期比较，#P<0.05

A:PAPP-A水平比较; B:AFP水平比较; C:uE3水平比较 图1 子痫前期患者与对照组孕产妇血清PAPP-A、AFP及uE3比较

2 联合检查预测子痫前期价值 见图2。分别以血清PAPP-A、AFP、uE3及三者联合为参考指标诊断子痫前期的敏感性分别为67.3%，62.7%，60.8%和73.6%，特异性分别为66.1%，，63.2 %，60.0%及70.6%。诊断的ROC曲线下面积分别为0.75，0.72，0.70及0.81，

讨 论

子痫前期是临床上较为常见的一类产科并发症，该并发症所引起的孕产妇死亡在所有孕产妇死亡的直接原因中居第三位[6]。其主要表现为高血压、蛋白尿、水肿等多器官功能紊乱，同时还常导致胎儿窘迫、胎儿生长受限、早产等一系列不良预后。子痫前期临床表现多变，病理复杂，临床除过终止妊娠，无有效的治疗方法[7]。目前对于子痫前期的发病机制及高危人群并不十分清楚，因而缺乏有效的子痫前期预测指标及预测模型。

图2 联合检查预测子痫前期价值的ROC曲线

研究表明子痫前期主要分为两个阶段，胎盘形成异常：滋养层细胞侵袭性明显下降，致使子宫内膜浸润不足，出现胎盘绒毛浅着床，引起子宫螺旋动脉的广泛重塑障碍，进一步出现胎盘缺氧、缺血。胎盘功能异常分泌的因子进入母体血液循环会发生广泛的血管内皮损伤[8]。临床症状的出现：孕妇全身血管内皮细胞广泛损伤，造成多系统器官出现不同程度损伤，且伴随蛋白尿、高血压等子痫前期症状[9]。因此，分析孕妇血清中相关指标与子痫前期的发生关系，可更好地预测子痫前期的发生状况。

近年来的研究显示[10-11]，在子痫前期患者血清中某些细胞蛋白因子呈现表达水平降低，同时其降低程度与子痫前期严重程度存在相关性，提示其可能在子痫前期的发病机制中发挥作用，并有可能成为预测子痫前期的血清学标志物。这些血清因此包括血浆蛋白(PAPP-A)、甲胎蛋白(AFP)、游离雌三醇(uE3)、人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)及核转录因子(NF-B)等。顾玮等人[5]采用酶联免疫吸附法检测了66例子痫前期患者血清中的β-HCG、uE3和AFP水平，结果显示子痫前期患者血清中β-HCG、uE3和AFP与正常孕产妇相比明显降低。Spradley等人[6]研究也显示子痫前期患者血清中β-HCG、uE3显著低于正常产妇，并可作为预测子痫前期的参考指标。但上述指标单独作为预测子痫前期的血清学标志物应用价值有限，单独检测预测子痫前期的敏感性和特异性均较低。因此，将上述指标联合检测后采用数学模型进行合并，有望提高预测子痫前期的应用价值。

在本研究中，我们采用酶联免疫吸附法分别检测了轻度子痫前期、重度子痫前期患者及正常孕产妇血清中血浆蛋白(PAPP-A)、甲胎蛋白(AFP)及游离雌三醇(uE3)的水平，结果发现对照组血清PAPP-A、AFP及uE3蛋白水平著高于子痫前期组(P<0.05)；且轻度子痫前期组显著高于重度子痫前期组(P<0.05)；研究说明，上述指标可以作为预测子痫前期的标志物，同时由于其在轻度及重度子痫患者血清中同样存在差异，因而也可以通过检查血清中上述指标的水平对子痫前期严重程度进行评估。在本研究中，我们根据贝叶斯定理，分别以血清PAPP-A、AFP、uE3及三者联合为参考指标，预测子痫前期的敏感性和特异性。研究结认为，联合检测预测价值显著高于单一检测。因此，我们认为，子痫前期患者血清PAPP-A、AFP及uE3表达水平明显降低，可作为预测子痫前期的血清学标志物。

[1] Lambert G，Brichant JF，Hartstein G，etal.Preeclampsia: an update[J].Acta anaesthesiologica Belgica，2014，65(4):137-49.

[2] Giannubilo SR，Landi B，Ciavattini A.Preeclampsia: what could happen in a subsequent pregnancy?[J].Obstet Gynecol Surv，2014，69(12):747-62.

[3] Valdes E，Sepulveda-Martinez A，Tong A，etal.Assessment of Protein:Creatinine Ratio versus 24-Hour Urine Protein in the Diagnosis of Preeclampsia[J].Gynecol Obstet Invest，2015，135：2478.

[4] Andersen LB，Frederiksen-Moller B，Work HK，etal.Diagnosis of preeclampsia with soluble Fms-like tyrosine kinase 1/placental growth factor ratio: an inter-assay comparison[J].J Am Soc Hypertens，2015，9(2)：86-96.

[5] 顾 玮，林 婧，侯燕燕.妊娠早中期孕妇血清中β-hCG、PAPP-A、AFP及uE3水平检测在联合预测子痫前期中的价值[J].中华妇产科杂志，2015，50(2):101-107.

[6] Spradley FT，Palei AC，Granger JP.Increased risk for the development of preeclampsia in obese pregnancies: weighing in on the mechanisms Regulatory，integrative and comparative physiology[J].American journal of physiology，2015，309(11)：1326-1343.

[7] Saxena AR，Seely EW，Rich-Edwards JW，etal.First trimester PAPP-A levels correlate with sFlt-1 levels longitudinally in pregnant women with and without preeclampsia[J].BMC Pregnancy Childbirth，2013，13(4)：85-94．

[8] Kajdácsi E，Jani PK，Csuka D，etal.Endothelial cell activation during edematous attacks of hereditary angioedema typesⅠandⅡ[J].J Allergy Clin Immunol，2014，133(6) : 1686-1691.

[9] Ananth CV，Keyes KM，Wapner RJ.Pre-eclampsia rates in the United States，1980-2010: age-period-cohort analysis[J].BMJ，2013，347: f6564．

[10] 张文慧，李坚雄，连旭波.IL-1β在子痫前期早期诊断中的意义[J].泰山医学院学报，2015，32(1):49-50.

[11] 靳桂香，孙珍妮，刘 品，等.ROC曲线评价血浆D-二聚体水平在子痫前期诊断中的价值[J].山东医药，2015，32(13)：50-51.