高效液相色谱测定甘草酸的研究进展

田建军 张彦波 夏立君 张明明

【摘 要】概述了近年来应用高效液相色谱法测定甘草不同制剂类型甘草酸的研究进展。重点介绍了胶囊剂、粉剂、注射剂、冲剂、片剂甘草酸的研究进展。

【关键词】高效液相色谱法；甘草；制剂；甘草酸

【中图分类号】R917 【文献标识码】A 【文章编号】1005-0019（2018）22--01

1 前言

中药甘草性甘，进入肝脏，脾脏，肺经脉，补脾益气，清热和解毒，祛痰和咳嗽，缓解疼痛，缓解压力，调和各种药物。有助于脾胃虚弱，疲劳，心悸，气短，呼吸短促，咳嗽和痰，腹部和四肢瘫痪的疼痛，发红，痛苦的中毒，减少药物的毒性和强度[1]。甘草具有广泛的功能，包括抗炎剂、抗过敏剂、抗惊厥剂、抗病毒、抗癌、镇痛药、利尿剂等。

現代研究表明甘草酸是甘草中最重要的活性成分之一。甘草酸广泛用于治疗急性、慢性肝炎、支气管炎和艾滋病，因为其具有糖皮质激素的药理作用，并且没有严重的副反应。它有防癌、抗癌，干扰素诱生剂和细胞免疫调节功能[2]。测定甘草酸的方法包括比色法、气相色谱法、薄层色谱法和高效液相色谱法[3-6]。高效液相色谱法，由于其简单的操作，高灵敏度，快速的分析速度以及良好的可再生性而被广泛使用。

2 胶囊剂

李冬梅等[7]人决定用hplc法测定甘草酸的含量，Shugan胶囊通过高效液相色谱法。色谱柱为Hypersil C18柱（250mm×4.6mm，5um），以甲醇-水-冰醋酸（63：37：1）为流动相，流速为1.0ml/min，测波长为254nm，色谱柱上的理论柱的数量不少于2000的甘草酸，而甘草提取物的成分在这种情况下是完全分开的，甘草酸的分离度大于1.5，结果表明，甘草酸之间有良好的线性关系和峰面积积分，质量浓度在10-100ug/ml的浓度范围。甘草酸回收率为101.0%，RSD回收率为1.4%；王志平等[8]用采用HPLC法测定复方甘草酸胶囊中的甘草酸苷含量。采用Vercopak（ODS-3：4.6mm×150mm，5μm）色谱柱，流动相为乙腈-0.01mol/L-H3PO4水溶液（38：62），柱温30℃，流速1.0ml/min，检测波长249nm。测定出甘草酸苷39.8～199μg/ml的范围呈良好线性，相关系数为R2=0.9996，平均加样回收率为98.99%，RSD为0.98%；张轶华[9]采用高效液相色谱法测定甘草酸二铵胶囊。色谱柱为Agilent Extend-C18柱，流动相为乙腈-0.01mol·L-1磷酸溶液（38∶62），检测波长为252nm，柱温为35℃，流速为1.0mL·min-1，进样量为20μL结果：甘草酸二铵检测浓度在12.5～1250?g·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系；平均回收率为100.1%，RSD=0.3%。

3 粉剂

尹丽平[10]应用高效液相色谱法测定甘草酸粉中甘草酸的含量。色谱柱：内径4～6mm，长15～25cm的不锈钢管。填充剂为液相色谱用硬脂酸硅胶5～10um，流动相：稀乙醇（1～15）/乙腈混合液（3：2）；结果甘草酸在20.72～124.32μg/mL范围内有良好的线性关系，r= 0.9999（n= 5），平均回收率为97.08%。

4 注射剂

刘海静等[11]用HPLC法测定强力宁注射液中甘草酸单铵的含量。采用C18反相柱，检测波长258nm，流动相为乙腈-0.01mol/L醋酸铵（3∶ 7）；平均回收率99.63%（RSD为1.07%）；甘草酸单铵在40～200μg/ml浓度范围呈良好的线性关系。

5 冲剂

宋洪杰等[12]应用HPLC法测定胃脘舒冲剂中甘草酸的含量。色谱柱为Shim-packCLC-ODS（6.0mm×150mm，5um），以甲醇-水–36%冰醋酸（65：28：7）为流动相，流速为1.0ml/min，测波长为254nm，甘草提取物各成分在此条件下得到很好地分离，结果是甘草酸在质量浓度18-300ug/ml范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系，加样回收率98.35±3.34%，RSD为3.39%。日内变异1.63%，日间变异3.35%；许杨彪等[13]测定了健胃茶中甘草酸含量，色谱柱为Inertsil ODS-3柱，流动相为甲醇-0.2mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸（67：33：1），测波长为250nm，以流动相超声提取30min，流速为1.0ml/min，结果甘草酸进样量在0.784-4.70ug范围内与峰面积积分值线性关系良好（r=0.9999），平均回收率为99.1%（RSD=1.26%）。

6 片剂

邰顺章等[14]通过HPLC法测定复方桔梗止咳片中甘草酸及甘草苷的含量。采用Agilent C18（4.6mm×150mm，5μm）色谱柱；以乙腈-0.05%磷酸为流动相进行梯度洗脱；流速1.0mL·min-1；检测波长237nm；进样量：10μL；柱温30℃。结果：甘草苷、甘草酸分别在10.65～42.60mg·L-1、97.30～389.30mg·L-1范围内呈良好的线性关系，r分别为1.0000、1.0000；平均回收率（n=6）分别为98.80%（RSD=0.73%）、99.84%（RSD=0.10%）。测得6批复方桔梗止咳片，每片分别含甘草苷135.28μg、123.16μg、113.21μg、136.08μg、160.84μg、156.32μg，甘草酸441.36μg、405.86μg、364.69μg、446.93μg、518.22μg、509.65μg。

7 结语

应用HPLC法测定甘草制剂的类型多样化，其测定方法虽有差异，但甘草酸含量的测定结果都具有一定研究价值，对于药物质检或研制方面具有指导意义。另有实验表明，例如长期服用大剂量的药物，可能会导致类醛固酮样的副作用，主要是由高血压，低钾血症和水，钠潴留和其他症状引起的。这种机制被认为与这种药物结构中的皮质类固醇的结构有关。因此如何有效利用甘草酸来减少副作用的发生是一个值得探讨和研究的课题。简而言之甘草酸的药理学机制是多方面的，它的应用已经扩展到诸如抗肝炎病毒，抗艾滋病，抗癌，防癌，以及免疫增强的领域。

参考文献

王修荣，王岩树.浅谈甘草的功效及应用.实用中医药杂志.2005，4：23-25.

国家药典委员会编.中华人民共和国药典（一部）[S].北京：化学工业出版社，2005.

陆蕴如，邵爱新.用香草醛一硫酸比色法测定饮片甘草及蜜炙廿草中甘草酸含量[J].药物分析杂志，1981，1（2）：84-86.

吕坚，吴锡铭，周腈.气相色谱法测定人鼠血浆中18-β甘草酸差向异构体含量[J].中国药学杂志，1993，28（9）：552.