温度对测定阿司匹林肠溶片中游离水杨酸的影响分析

岳俊丽 关慧

北京科信必成医药科技发展有限公司哈尔滨分公司 150000

温度对测定阿司匹林肠溶片中游离水杨酸的影响分析

岳俊丽 关慧

北京科信必成医药科技发展有限公司哈尔滨分公司 150000

目的：分析温度的高低对阿司匹林肠溶片含量测定的影响，尤其是对游离水杨酸的含量测定影响。方法：利用 HPLC法进行测定，通过三次进样，并以其峰面积的 RSD 值作为衡量依据。结果：阿司匹林肠溶片在 10¯30 ℃的温度范围内，随着温度的升高水解成游离水杨酸的速度加快。结论：在测定阿司匹林肠溶片中游离水杨酸的含量时，最好将温度控制在20℃以下，这样得到的测定结果更加稳定精准。

阿司匹林肠溶片；游离水杨酸；温度；测定

在临床上，常常使用阿司匹林肠溶片来为患者解热镇痛，同时还具有一定的抗血小板凝聚的功效。在阿司匹林肠溶片中，游离水杨酸的含量多少决定了药品的作用和功效，是其主要的药物成分。一般来讲，游离水杨酸是由于在生产中水杨酸乙酰化不完全而带入，也有可能在贮存期间由乙酰水杨酸水解产生。因为水杨酸是一种具有毒性的物质，所以必须要控制阿司匹林肠溶片中的含量，若含量过高，人服用后可能会产生较大的副作用，不利于人体健康。现如今对于阿司匹林肠溶片中游离水杨酸的测定多采用高效液相色谱法。在实际的工作中，发现温度不同的情况下，游离水杨酸的含量测定结果也有所不同。为了研究其相关的规律，本文研究了温度对测定阿司匹林肠溶片中游离水杨酸的影响，得出温度与测定值的关系，以供参考。

1、仪器与方法

1.1 仪器：安捷伦1260高效液相色谱仪；赛多利斯CPA225D电子天平；DZKW-C型电子恒温水浴锅。

1.2 试药：阿司匹林肠溶片，规格25 mg；生产厂家：江苏平光制药有限责任公司，批号分别为120202、120305、120701。

1.3 实验方法：取阿司匹林肠溶片10片，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.1 g），置100 mL量瓶中，用1%冰醋酸的甲醇溶液振摇使阿司匹林溶解，并稀释至刻度，摇匀，滤膜滤过，取续滤液作为供试溶液。照高效液相色谱法测定。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20∶5∶5∶70）为流动相；检测波长为303 nm。精密量取供试品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图。

1.4 供试品溶液的制备：本实验选择温度较低的冬季进行，以减少环境的干扰，外界环境在10 ℃以下，样品制备后先在10 ℃的水浴中放置，液相色谱系统稳定后即开始第一次进样，每次进样后迅速将样品瓶侵入已设定好温度的水浴锅中，恒温至下一个进样时间点取出进样，考察温度点为10、15、20、25、30 ℃，每个温度点进样3次。

2、结果

结果见表1。

表1 游离水杨酸生成速率随温度变化的情况

由表1可以清楚的看到，在普通实验室试验要求的温度条件下，即 10～30 ℃温度范围内，游离水杨酸的生成速率随外界温度的升高越变越快。当环境温度超过20 ℃以后，由于水杨酸生产的速率加快，导致测定结果变化太快，结果的重现性非常的差，无法满足液相色谱的系统适用性实验的要求，而在20 ℃以下，三个批次在三个温度点，测定三次峰面积的RSD值均在1.5%以下，符合中国药典高效液相色谱法项下规定的系统适应性试验的要求，是比较适宜的测定温度。

3、讨论

由于阿司匹林肠溶片的适应症为阿司匹林对血小板聚集的抑制作用，因此阿司匹林肠溶片适应症如下：降低急性心肌梗死疑似患者的发病风险预防心肌梗死复发中风的二级预防降低短暂性脑缺血发作（TIA）及其继发脑卒中的风险降低稳定性和不稳定性心绞痛患者的发病风险动脉外科手术或介入手术后，如经皮冠脉腔内成形术（PTCA），冠状动脉旁路术（CABG），颈动脉内膜剥离术，动静脉分流术预防大手术后深静脉血栓和肺栓塞降低心血管危险因素者（冠心病家族史、糖尿病、血脂异常、高血压、肥胖、抽烟史、年龄大于50岁者）心肌梗死发作的风险。

从药理上讲，阿司匹林抑制血小板血栓素A2的生成从而抑制血小板聚集，其机理为不可逆的抑制环氧合酶的合成；由于血小板内这些酶不可再合成，所以此抑制作用尤为显著。阿司匹林对血小板还有其他抑制作用。因此它可广泛应用于心血管疾病。但同时，通过动物试验显示高剂量水杨酸引起肾损害但无其它器官损害。体内和体外试验表明阿司匹林无致畸性和致癌性。水杨酸盐在不同种类的动物可能有致畸性。也有报道称孕期服用可影响孕卵着床，致胚胎毒性和胎毒性，子代学习能力障碍。

从毒代学上讲，水杨酸盐毒性（剂量大于 100mg/kg/天、超过 2天可导致毒性）可能致需治疗的慢性中毒，以及潜在的威胁生命的急性中毒（过量），儿童偶然摄入导致中毒。慢性水杨酸盐中毒可表现为隐性无特异症状。轻度慢性水杨酸盐中毒，或水杨酸反应，通常在大剂量反复服用后发生。症状包括头晕，眩晕，耳鸣，耳聋，出汗，恶心和呕吐，头痛，以及意识错乱，减少剂量后可得以控制。血浆浓度为150-300mg/mL可出现耳鸣。血浆浓度为300mg/mL以上时，可发生更严重的不良反应。急性中毒的主要特征为严重的酸碱平衡紊乱，可能随年龄和中毒程度不同。儿童常表现为代谢性酸中毒。中毒的严重程度不能仅根据血浆浓度进行评估。

因此，在生产阿司匹林肠溶片的过程中，必须要确保水杨酸的含量在要求范围内，不可超标。目前阿司匹林系列药物中规定游离水杨酸的测定，主要目的是考察药物在生产和效期内贮存时产生的游离水杨酸的量，并用限度加以控制，应尽量减小实验条件对药物测定结果的影响，药典也从这点出发，规定阿司匹林系列药品中游离水杨酸的测定应临用新制，可见阿司匹林在规定的溶剂中水解的速度是很快的。目前很多研究者大多都是从溶剂方面考虑，改变溶剂的品种和pH值，这也是解决问题的一种思路，而本文认为温度也是影响阿司匹林水解的重要因素之一，药典没有规定试验温度条件，这给试验结果造成不确定性，25 ℃时进样时间滞后几分钟，游离水杨酸测定值变化就很大，如果药品的游离水杨酸值处在限度的边缘，结果的判定就会存在很大的争议。

通过本文的试验结果可以看出，在测定阿司匹林肠溶片的游离水杨酸时，最好在20 ℃以下进行测定，这样的结果稳定性更好，也更客观准确。

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