热休克蛋白47在日本血吸虫病肝纤维化病程的动态变化

邓菊红，陶 然，焦云桃，李 兰，范翔雪，黄加权

·论 著·

热休克蛋白47在日本血吸虫病肝纤维化病程的动态变化

邓菊红，陶 然，焦云桃，李 兰，范翔雪，黄加权

目的观察热休克蛋白47（heat shock protein 47, HSP47）在日本血吸虫病患者肝脏组织中的表达情况及其在日本血吸虫病肝纤维化小鼠动物模型中的动态变化。方法收集2008—2012年期间同济医院门诊和住院部日本血吸虫病肝纤维化患者肝穿标本72例。用免疫组织化学法检测HSP47表达；Masson染色观察胶原增生情况；实时荧光定量PCR检测HSP47、I型胶原、结缔组织生长因子（connective tissue growth factor, CTGF）及转移生长因子-β1（transforming growth factor-β1, TGF-β1）mRNA水平的表达。构建实验性日本血吸虫病肝纤维化小鼠模型，分别于感染后第6、8、12周取小鼠肝组织，用免疫组织化学法检测HSP47表达，采用实时荧光定量PCR及Western blot检测HSP47的mRNA和蛋白水平表达及I型胶原纤维增生情况。结果日本血吸虫病肝纤维化患者肝组织中的HSP47主要表达在肝脏间质细胞及虫卵结节周围，并随纤维化程度进展显著增多（P均＜0.01），与I型胶原增生趋势平行。各纤维化分期患者肝组织胶原及纤维化相关因子CTGF及TGF-β1 mRNA表达均明显高于S0期无纤维化患者（P均＜0.01）。在肝纤维化模型小鼠中HSP47随纤维化进展其表达亦显著升高，感染后第6、8、12周，HSP47及I型胶原的表达量均显著高于正常对照小鼠（P均＜0.01），同血吸虫病肝纤维化患者的表达趋势一致。结论HSP47在日本血吸虫病肝纤维化患者和日本血吸虫病动物模型肝组织中表达均上调，且随I型胶原、CTGF、TGF-β1增多呈相同趋势，其有望成为肝纤维化新的诊断标志和治疗靶点。

HSP47；肝纤维化；日本血吸虫病；Ⅰ型胶原；CTGF；TGF-β1

日本血吸虫病是一种严重威胁人类生命健康的寄生虫病，该病广泛流行于亚洲、非洲和拉丁美洲，中国共有日本血吸虫病患者约36万人[1]。日本血吸虫病引起的肝纤维化有其独特之处，即虫卵肉芽肿纤维化后导致纤维组织在肝脏中的积累，形成干线型肝硬化，阻塞通往肝脏的血流，最终形成门脉高压[2-4]。作为胶原特异性分子伴侣的热休克蛋白47（heat shock protein 47, HSP47），主要存在于肝脏胶原合成细胞如肝星状细胞（hepatic stellate cells, HSCs）的内质网中，因参与前胶原在内质网中修饰、折叠、装配等整个加工过程，其合成与前胶原产量有密切关系而备受关注[5-7]。既往对HSP47的研究主要局限于非病原体感染模型中，而其在血吸虫肝纤维化中的作用鲜有报道。本研究根据文献建立血吸虫卵（病原体感染）诱导小鼠肝纤维化模型[8]，以此探讨HSP47在日本血吸虫病肝纤维化病程中的作用。

1 材料与方法

1.1 标本来源 选取2008—2016年期间在华中科技大学同济医学院附属同济医院门诊及住院部收治的日本血吸虫病患者肝组织标本共72例。血吸虫病诊断标准参照中华人民共和国卫生行业标准《血吸虫病诊断标准WS261-2006》。入组条件：有明显的疫水接触史；粪检中曾找到虫卵或毛蚴，或血清学检查阳性；血清学HBsAg和HBeAg均阴性；无嗜酒史。主要临床表现为乏力、纳差、腹胀、腹泻或便秘、肝脏肿大。本研究临床标本的采集均征得患者本人知情同意，并由医院伦理委员会审核批准。

患者经肝脏B超定位后行肝组织穿刺活检，部分肝组织于4%多聚甲醛中固定，石蜡包埋并切片，行HE及Masson染色和免疫组织化学（免疫组化）检测，剩余组织用于肝组织总RNA及蛋白的提取。HE及Masson染色切片光镜下病理学检查采用Scheuer法，该法将肝纤维化分为S0～S4期。S0期：无纤维化。S1期：汇管区纤维化扩大，局限窦周及小叶内纤维化。S2期：汇管区周围纤维化，纤维间隔形成，小叶结构保留。S3期：纤维间隔伴小叶结构紊乱，无肝硬化。S4期：早期肝硬化。炎症活动度分为G0～G4级。包括汇管区及汇管区周围炎症与小叶内炎症两项，当两项程度不一致以炎症活动度高者为准。G0级：无炎症。G1级：汇管区炎症或小叶内变性及少数点状坏死。G2级：汇管区轻度碎屑样坏死或小叶内变性，点、灶状坏死，嗜酸性小体。G3级：汇管区中度碎屑样坏死或小叶内融合坏死。G4级：汇管区重度碎屑样坏死或小叶内广泛桥接坏死，累及多个小叶。

实验动物选取6周龄，体质量为（20±5）g的雌性SPF级Balb/c J小鼠（购自湖北省疾病预防控制中心动物房），12/12 h昼夜循环条件下自由摄取食物和饮水。日本血吸虫尾蚴感染性野生钉螺购自江西省血吸虫病防治研究所。

1.2 日本血吸虫肝纤维化小鼠模型构建 将50只雌性Balb/c J小鼠随机分成感染前和感染后6、8、10、12 周，共5组，每组10只。感染组每只小鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴（16±1）条，对照组以不含尾蚴的去氯水处理。脱颈处死小鼠，无菌留取肝组织，一部分置于-80 ℃冰箱保存，用于提取小鼠肝脏总RNA；一部分置于4%多聚甲醛固定，用于免疫组化检测。

1.3 免疫组化检测 取血吸虫病患者及感染前和感染后6、8、12周小鼠肝组织，经固定、包埋、切片后，按兔二步法免疫组化试剂盒说明书进行HSP47免疫组化检测。操作步骤：切片（厚4 μm）常规脱蜡水化，高温修复20 min，3%过氧化氢室温孵育30 min，PBS振洗，滴加山羊血清封闭30 min，倾去液体，滴加抗HSP47抗体（1∶200），4 ℃过夜。次日先用PBS振洗，滴加二抗（1∶100），37 ℃孵育30 min，PBS再次振洗，滴加DBA，显微镜下控制显色，并以去离子水终止反应，苏木素复染20 s左右，流水冲洗1次，盐酸乙醇分化5 s，再次流水冲洗5 min返蓝，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。

1.4 Masson胶原染色 选取S1～S4期患者肝活检组织，石蜡包埋切片，经苏木素、Masson复合染色液、苯胺蓝染料行染色处理后，梯度乙醇脱水，中性树胶封片。

1.5 结果判定标准 免疫组化及Masson染色切片均由2名资深病理科医师双盲独立观察评估。免疫组化检测以细胞质或细胞膜出现黄至棕褐色颗粒为阳性显色。Masson染色以蓝染部分表示胶原纤维。分别从患者及小鼠肝组织的每张切片中随机选取5个不重复视野，运用Image-Pro Plus 6.0显微图像分析系统对图像进行半定量计算分析，按视野中棕褐色颗粒面积或蓝染面积占该视野面积的百分比（%）表示。

1.6 RNA抽提和荧光定量PCR检测 取肝组织100 mg，于液氮预冷的研钵中研磨后加入1 ml Trizol裂解液，提取肝脏总RNA，采用紫外分光光度计检测并计算人HSP47、结缔组织生长因子（connective tissue growth factor, CTGF）、转化生长因子-β（transforming growth factor-β, TGF-β）、Ⅰ型胶原α1链（collagen typeⅠalpha 1, COL1A1）RNA和小鼠HSP47、COL1A1 RNA浓度，按试剂盒说明书进行反转录反应。运用Oligo 6软件进行PCR引物设计（引物序列见表1）。PCR反应条件：94 ℃预变性3 min，94 ℃变性30 s，58 ℃退火30 s，72 ℃延伸1 min，主循环30个，72 ℃终延伸10 min。通过管家基因 GAPDH（或β-actin）对目标基因mRNA的表达进行校正。

1.7 Western blot测定 取冰冻肝脏标本，在冰浴下剪取少许，放入玻璃匀浆器，按照组织蛋白提取试剂盒说明操作。上样前用二喹啉甲酸法测定待测样品蛋白浓度。先进行SDS-PAGE，每孔加蛋白样品80 μg，电泳分离后，电转至硝酸纤维素膜，用0.5%脱脂奶粉封闭30 min，加抗HSP47抗体（1∶500），4 ℃孵育过夜。次日TBST洗膜，分别加入抗兔二抗（1∶5000），室温振摇孵育1 h，TBST洗膜，加入增强化学发光液1 min，暗室显影2～5 min，冲洗胶片。采用Tanon2500凝胶成像分析系统摄像并分析各条带吸光度值（目的蛋白相对值=目的条带吸光度值/β-actin吸光度值）。

1.8 统计学处理 应用SPSS 22.0软件进行统计学分析，计量资料呈正态分布或近似正态分布，以±s表示，多组计量资料间比较采用单因素方差分析（组间方差齐），多重比较采用q检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

表1 引物序列Table 1 Sequences of primer

2 结 果

2.1 日本血吸虫病肝纤维化患者肝组织中HSP47及胶原表达 将患者肝活检组织行免疫组化染色及Masson胶原染色。HSP47表达的主要集中在间质细胞胞浆内，呈棕褐色颗粒，且随纤维化进展，HSP47阳性细胞表达显著增多（图1，表2）。同时，Masson染色显示胶原（呈蓝色）含量与肝纤维化分级趋势相同（图1，表2）。经图像分析系统半定量分析，肝组织HSP47及胶原表达在S1～S4各期差异具有统计学意义（P=0.000）。HSP47阳性表达率在S2～S4期肝纤维化患者肝组织中明显高于S1期肝组织（P均＜0.01），以S4期肝组织HSP47表达水平最高，且显著高于S2期（P=0.000）、S3期（P=0.001）。肝组织胶原沉积量在S2～S4期较S1期明显增多（P均＜0.01），其中以S4期最高。

图1 日本血吸虫病肝纤维化患者肝组织HSP47及胶原表达A～D. 日本血吸虫病肝纤维化患者肝组织HSP47免疫组化染色（×400）；E～H. 日本血吸虫病肝纤维化患者肝组织Masson染色（×200）；A、E. S1期患者肝组织；B、F. S2期患者肝组织；C、G. S3期患者肝组织；D、H. S4期患者肝组织Figure 1 HSP47 and collagen expression in liver tissue from patients with Schistosoma japonicum-induced hepatic fibrosis

2.2 日本血吸虫病肝纤维化患者肝组织HSP47 mRNA水平 S0～S4期患者肝组织HSP47 mRNA表达随肝纤维化进展显著增加（表3），且各期表达差异具有统计学意义（P=0.000）。HSP47 mRNA水平在肝纤维化S1～S4期均明显高于S0期（P均＜0.01），于S3期升至峰值（P均＜0.01），但S2期与S4期比较，差异无统计学意义（P=0.147）。另将患者肝活检组织按炎症活动度分级统计HSP47 mRNA表达（表4），肝炎G3级患者肝组织HSP47 mRNA水平显著高于G1级和G2级（P＜0.01），但G1级与G2级比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

2.3 不同纤维化分期患者肝组织胶原及纤维化相关因子mRNA表达 肝组织COL1A1、CTGF及TGF-β1 mRNA在S0～S4期肝纤维化患者中表达水平见表5，各期差异具有统计学意义（P=0.000）。COL1A1 mRNA相对表达量以S4期最高，其次为S3、S2、S1期（P均＜0.05）。CTGF mRNA随S0～S4期呈持续增加，S4期显著高于S0～S3期（P均＜0.01），但S0期与S1期比较，CTGF mRNA表达差异无统计学意义（P=0.155）。TGF-β1 mRNA在S0期即有表达，其趋势亦与肝纤维化分期程度趋势相同，S1～S4期均显著高于S0期（P均＜0.01），以S3期最高，但与S2期比较，差异无统计学意义（P=0.847）。

表2 日本血吸虫病患者不同肝纤维化分期肝组织HSP47和Ⅰ型胶原阳性表达率（±s，%）Table 2 Positive expression rates of HSP47 and collagen type I in liver tissue from different stages of hepatic fibrosis in patients with Schistosomiasis japonica(±s, % )

表2 日本血吸虫病患者不同肝纤维化分期肝组织HSP47和Ⅰ型胶原阳性表达率（±s，%）Table 2 Positive expression rates of HSP47 and collagen type I in liver tissue from different stages of hepatic fibrosis in patients with Schistosomiasis japonica(±s, % )

注：多重比较采用q检验。a. 与S1期比较，P＜0.01；b. 与S2期比较，P＜0.01；c. 与S3期比较，P＜0.01

肝纤维化分期 例数 HSP47 Ⅰ型胶原S1期 18 1.97±0.82 1.76±0.52 S2期 15 5.76±4.53a 8.39±1.58aS3期 17 18.34±2.15ab 20.31±2.28abS4期 14 22.34±1.82abc 25.91±1.93abcF值 219.700 679.800 P值 0.000 0.000

表3 不同肝纤维化分期日本血吸虫病患者肝组织HSP47 mRNA相对表达水平（±s）Table 3 The relative expression of HSP47 mRNA in liver tissue from different pathological stages of hepatic fibrosis in patients with Schistosomiasis japonica(±s)

表3 不同肝纤维化分期日本血吸虫病患者肝组织HSP47 mRNA相对表达水平（±s）Table 3 The relative expression of HSP47 mRNA in liver tissue from different pathological stages of hepatic fibrosis in patients with Schistosomiasis japonica(±s)

注：多重比较采用q检验。a. 与S0期比较，P＜0.01；b.与S1期比较，P＜0.01；c. 与S2期比较，P＜0.01；d. 与S3期比较，P＜0.01

肝纤维化分期 例数 HSP47 mRNA(与β-actin比值) S0期 8 0.10±0.01 S1期 18 0.64±0.07aS2期 15 1.10±0.13abS3期 17 2.05±0.40abcS4期 14 0.91±0.16abdF值 143.600 P值 0.000

表4 不同炎症分级日本血吸虫病患者肝组织HSP47 mRNA相对表达水平（±s）Table 4 The relative expression of HSP47 mRNA in liver tissue from different pathological grades of hepatitis in patients with Schistosomiasis japonica(±s)

表4 不同炎症分级日本血吸虫病患者肝组织HSP47 mRNA相对表达水平（±s）Table 4 The relative expression of HSP47 mRNA in liver tissue from different pathological grades of hepatitis in patients with Schistosomiasis japonica(±s)

注：多重比较采用q检验；a. 与G1级比较，P＜0.01；b. 与G2级比较，P＜0.05

炎症分级 例数 HSP47 mRNA(与β-actin比值) G1级 43 0.87±0.11 G2级 13 0.90±0.17 G3级 16 1.19±0.33abF值 17.030 P值 0.000

表5 日本血吸虫病患者肝组织COL1A1、CTGF、TGF-β1 mRNA相对表达量（±s）Table 5 The relative expression of COL1A1, CTGF, TGF-β1 mRNA in liver tissue from patients with Schistosoma japonicum(±s)

表5 日本血吸虫病患者肝组织COL1A1、CTGF、TGF-β1 mRNA相对表达量（±s）Table 5 The relative expression of COL1A1, CTGF, TGF-β1 mRNA in liver tissue from patients with Schistosoma japonicum(±s)

注：多重比较采用q检验。a. 与S0期比较，P＜0.01；b. 与S1期比较，P＜0.01；c. 与S2期比较，P＜0.01；d. 与S3期比较，P＜0.01

化分期 例数 COL1A1 mRNA (与β-actin比值)肝纤维TGF-β mRNA (与β-actin比值) S0期 8 0.08±0.01 0.17±0.03 0.23±0.05 S1期 18 0.28±0.03 0.24±0.02 0.47±0.05aS2期 15 0.54±0.08ab 0.41±0.07ab 0.79±0.16abS3期 17 0.89±0.23abc 0.58±0.08abc 1.06±0.16abcS4期 14 1.39±0.20abcd 0.91±0.11abcd 1.01±0.18abcF值 166.400 227.500 82.830 P值 0.000 0.000 0.000 CTGF mRNA (与β-actin比值)

2.4 日本血吸虫小鼠模型血清生化指标的动态变化 小鼠肝脏行HE及Masson染色，镜下可见虫卵及虫卵周围肉芽肿，肉芽肿内胶原纤维含量随着纤维化进展逐渐增多，提示日本血吸虫肝纤维化小鼠模型构建成功。

2.5 HSP47及胶原纤维在日本血吸虫纤维化小鼠模型肝组织中的表达 免疫组化染色显示，感染第6、8、12周小鼠肝组织均有不同程度HSP47表达（图2），且HSP47阳性细胞主要集中于虫卵周围且纤维化明显区域，并随纤维化程度加重表达量增加。感染不同时间点HSP47 mRNA及COL1A1 mRNA水平与正常对照组比较（表6），差异均有统计学意义。HSP47 mRNA于感染第6、8、12周均显著高于正常对照组（P均＜0.01），感染第8周表达水平最高，但与感染第12周比较，HSP47 mRNA水平差异无统计学意义（P=0.356）。Western blot结果表明HSP47蛋白水平表达趋势与HSP47 mRNA相同（见表7）。感染血吸虫钉螺后肝脏COL1A1 mRNA则均明显高于正常对照组（P均＜0.01），以感染第12周表达水平最高，其次为感染第8周和感染第16周（P均＜0.01）。

3 讨 论

肝纤维化是慢性持续性肝损伤后的一种瘢痕性修复反应，可进展为肝硬化，也可由于肝脏本身具有再生能力，逐渐吸收瘢痕而具有逆转的潜能[9]。肝纤维化的发生机制主要是肝内细胞外基质（extracellular matrix, ECM）合成与降解失衡，尤其是ECM中胶原纤维大量沉积[10]。研究发现HSP47与胶原过度沉积、组织纤维化密切相关，主要表达在纤维间隔和HSCs中[11]。本研究将临床血吸虫病患者肝活检组织进行肝纤维化分期及炎症活动度分级，HSP47 mRNA表达水平随肝纤维化的加重而逐渐上调，S3期达高峰后，S4期有所下降。S4期HSP47表达水平的下降可能与肝内HSCs数目的减少有关，肝纤维化进展至早期肝硬化后，肝脏内的各种代偿功能减弱，同样HSCs的数目增加受到限制，最终导致HSP47的表达较S3期有所下降。此结果也说明，HSP47表达高低不仅与单个活化HSC的HSP47表达量有关，还与HSCs的数目密切相关[12]。此外，根据炎症活动度分级，在各级炎症均可发现HSP47 mRNA高表达，提示HSP47在血吸虫肝纤维化中可能通过介导炎症促进组织纤维化[13]。患者肝活检组织行HSP47免

表6 HSP47及COL1A1 mRNA在日本血吸虫纤维化小鼠模型肝组织中的相对表达量（±s）Table 6 The relative expression of HSP47 and COL1A1 mRNA in liver tissue from mice with Schistosoma japonicuminduced hepatic fibrosis(±s)

表6 HSP47及COL1A1 mRNA在日本血吸虫纤维化小鼠模型肝组织中的相对表达量（±s）Table 6 The relative expression of HSP47 and COL1A1 mRNA in liver tissue from mice with Schistosoma japonicuminduced hepatic fibrosis(±s)

注：多重比较采用q检验。a. 与正常对照组比较，P＜0.01；b. 与感染6周组比较，P＜0.01；c. 与感染8周组比较，P＜0.01

组别 例数 HSP47 mRNA（与β-actin比值） COL1A1 mRNA（与β-actin比值）正常对照组 10 0.23±0.04 19.87±2.46感染6周组 10 0.86±0.03a 117.32±6.06a感染8周组 10 1.20±0.20ab 196.01±3.19ab感染12周组 10 0.78±0.06ab 226.12±4.78abcF值 140.200 4485.000 P值 0.000 0.000

图3 日本血吸虫小鼠肝纤维化模型肝组织HSP47蛋白水平表达变化Figure 3 The protein expression levels of HSP47 in the liver tissue of mice with Schistosoma japonicum-induced hepatic fibrosis

表7 日本血吸虫小鼠肝纤维化模型肝组织HSP47蛋白水平相对表达变化（±s）Table 7 The relative protein expression of HSP47 in liver tissue of mice with Schistosoma japonicum-induced hepatic fibrosis(±s)

表7 日本血吸虫小鼠肝纤维化模型肝组织HSP47蛋白水平相对表达变化（±s）Table 7 The relative protein expression of HSP47 in liver tissue of mice with Schistosoma japonicum-induced hepatic fibrosis(±s)

注：多重比较采用q检验。a. 与正常对照组比较，P＜0.01；b. 与感染6周组比较，P＜0.01

组别 例数 HSP47 mRNA(与β-actin比值)正常对照组 10 0.05±0.01感染6周组 10 0.25±0.16a感染8周组 10 0.50±0.03ab感染12周组 10 0.47±0.01abF值 66.250 P值 0.000

疫组化染色及Masson染色，S1～S4期均有HSP47表达，主要集中在间质细胞胞浆内，且随纤维化进展，HSP47阳性细胞表达数显著增多。同时，肝组织切片Masson染色显示胶原的沉积也随纤维化病理级别加重而增多。因此，日本血吸虫病患者在肝纤维化进展过程中，HSP47水平与Ⅰ型胶原表达量平行相关。在血吸虫肝纤维化小鼠模型中，本实验动态验证了从临床组织中观察到的现象：HSP47主要集中于虫卵周围且纤维化明显区域，且随胶原纤维表达增多，其水平显著增高。血吸虫肝纤维化胶原沉积在门脉周围导致干线状纤维化，主要由结缔组织形成网状结构，CTGF作为TGF-β1下游因子及纤维结缔组织特异性的生长因子，是一个重要纤维化相关因子[14-15]。本实验中，随着肝纤维化的持续进展，CTGF mRNA水平与血吸虫肝纤维化病理程度呈正比增加，促进肝纤维化的发展。正常生理状态下，TGF-β具有抗炎、调节免疫、促进细胞生长等作用，但若其过度表达，则会诱发肝组织纤维化，且与纤维化程度呈正相关。本研究中，患者TGF-β1在肝纤维化中明显上调，且其变化趋势与前期研究中血吸虫肝纤维化小鼠模型TGF-β1表达趋势一致[15]。随着肝纤维化的进展，HSP47在血吸虫肝纤维化患者和血吸虫动物模型肝组织中表达均上调，多表达在胶原增加部位，并与CTGF及TGF-β1促纤维化因子有相似增高趋势，有望成为肝纤维化新的诊断标志和治疗靶点。

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（2016-06-21收稿 2017-05-26修回）

（本文编辑 闫晶晶）

Dynamic change of heat shock protein 47 in Schistosoma japonicum-induced hepatic fibrosis

DENG Ju-hong, TAO Ran, JIAO Yun-tao, LI Lan, FAN Xiang-xue, HUANG Jia-quan*Department of Internal Medicine, Liyuan Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430077, China *Corresponding author, E-mail: huangjiaquan21@aliyun.com

ObjectiveTo assess the expression of heat shock protein 47 (HSP47) from the liver tissues in patients with Schistosoma japonicum-induced liver fibrosis, and to observe the dynamic changes of HSP47 expression in a rodent model of Schistosoma japonicum-induced liver fibrosis.MethodsLiver biopsy specimens from 72 outpatients and inpatients with Schistosoma japonicuminduced liver fibrosis were collected from Tongji Hospital from 2008 to 2012. Immunohistochemical and Masson staining were performed to assess the expression of HSP47 and collagen proliferation, respectively. The mRNA expression levels of HSP47, collagen type I, connective tissue growth factor (CTGF) and transforming growth factor-β1 (TGF-β1) were measured by real-time PCR. Experimental mouse model of schistosomiasis liver fibrosis was established, liver tissue was harvested at the 6th, 8th, 12th week after infected. Immunohistochemistry was used to detect HSP47 expression. Real-time PCR and western blot analysis were performed to detect the expression of HSP47 and collagen typeⅠ at transcriptional and protein level.ResultsHSP47-positive cells of liver biopsy samples were mainly localized in interstitial areas and the periphery of egg granulomas. The number of HSP47-positive cells was significantly increased with the aggravation of liver fibrosis (P＜0.01), in parallel with collagen typeⅠ deposition. The relative expression levels of HSP47, collagen type I, CTGF and TGF-β1 mRNA were significantly increased from fibrosis stage 1 to stage 4, as compared to stage 0 (P＜0.01). In rodent model of Schistosoma japonicum-induced hepatic fibrosis, the expression of HSP47 and collagen type Ⅰ was significantly higher than that in normal control mice at the 6th week, the 8th week and the 12th week after they were infected (P＜0.01), which was consistent with the expression change in patients with Schistosoma japonicum-induced liver fibrosis.ConclusionsThe expression of HSP47 is increased in patients with Schistosoma-induced fibrosis, as well as in animal models, and is raised with the expression increased of CTGF, TGF-β1 and collagen type Ⅰ. HSP47 may be a new diagnostic marker and a potential therapeutic target for liver fibrosis.

HSP47; hepatic fibrosis; Schistosomiasis japonica; collagen type Ⅰ; CTGF; TGF-β1

R512.91

A

1007-8134(2017)03-0156-06

10.3969/j.issn.1007-8134.2017.03.008

湖北省血吸虫病防治项目基金（XF2010-15，XF2012-17）；国家“十二五”科技重大专项（2014ZX10005001）

430077 武汉，华中科技大学同济医学院附属梨园医院内科（邓菊红）；430030 武汉，华中科技大学同济医学院附属同济医院感染科（陶然、焦云桃、李兰、范翔雪、黄加权）

黄加权，E-mail： huangjiaquan21@aliyun.com