CD4+T细胞及淋巴细胞亚群在小儿哮喘与肺炎中的水平及临床意义

李文良，高　亮

(1.山东省东营市广饶县中医院儿科，山东 东营 257300;2.广饶县妇女儿童医院儿科，邮编，257300)



CD4+T细胞及淋巴细胞亚群在小儿哮喘与肺炎中的水平及临床意义

李文良1，高亮2

(1.山东省东营市广饶县中医院儿科，山东 东营 257300;2.广饶县妇女儿童医院儿科，邮编，257300)

[摘要]目的探究CD4+T细胞及淋巴亚群在小儿哮喘与肺炎中的水平及临床意义。方法选取东营市广饶县中医院儿科自2013年9月至2015年9月收治的34例哮喘患儿作为哮喘组,33例肺炎患儿作为肺炎组，另选择同时期的正常体检小儿30例作为对照组，3组均在早晨空腹情况下抽取静脉血5mL，并于3小时内进行标本处理，后采用流式细胞技术检测外周血中CD4+T细胞内细胞因子T细胞辅助细胞(Th)1、Th2、Th17及外周血中CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞的水平。结果与对照组相比，哮喘组CD4+CD25+FOXP3+、CD4+IL-4+Th1及CD4+IL-17+Th17细胞百分比均增加明显，差异均具有统计学意义(t值分别为5.34、5.89、6.11，均P<0.05)。与对照组相比，肺炎组CD4+CD25+FOXP3+细胞百分比降低，差异具有统计学意义(t=4.56，P<0.05)。与肺炎组相比，哮喘组CD4+CD25+FOXP3+、CD4+IL-4+Th1、CD4+IL-17+Th17细胞百分比均增加，差异均具有统计学意义(t值分别为6.12、6.45、6.39，均P<0.05)。与对照组相比，哮喘组淋巴细胞水平降低，单核细胞、嗜酸性粒细胞水平升高，差异均具有统计学意义(t值分别为5.34、5.26、5.19，均P<0.05)。与对照组相比，肺炎组单核细胞水平升高，差异具有统计学意义(t=4.99，P<0.05)。与肺炎组相比，哮喘组嗜酸性粒细胞水平升高，差异具有统计学意义(t=5.29，P<0.05)。结论CD4+T细胞及淋巴细胞亚群检测在诊断与鉴别小儿哮喘与肺炎疾病时具有重要临床意义，为临床治疗提供参与依据。

[关键词]CD4+T细胞；淋巴细胞亚群；小儿哮喘；小儿肺炎

小儿哮喘及肺炎作为小儿呼吸系统常见病，其发生发展均受到了免疫系统的影响，随着对T细胞辅助细胞(Th)17研究的不断深入，人们开始将CD4+T细胞分为4个亚群，分别为Th1、Th2、Th17及调节性T细胞，并发现以上4类亚群在小儿免疫系统方面起到了重要作用，其中Th1及Th2免疫反应可能对气道产生保护作用或促进过敏反应、炎症的发生[1-2]。为了解CD4+及淋巴细胞亚群在小儿哮喘及肺炎中水平的异同，我们对此展开研究，并将结果总结报告如下。

1资料与方法

1.1研究对象

选取东营市广饶县中医院儿科自2013年9月至2015年9月収治的34例哮喘患儿作为哮喘组及33例肺炎患儿作为肺炎组，哮喘组中男20例，女14例，年龄在3至8岁之间，平均年龄为(5.9±1.3)岁，肺炎组中男22例，女11例，年龄在4至7岁之间，平均年龄为(5.5±1.5)岁。纳入及排除标准：均符合中华医学儿科学会呼吸学组制定的支气管哮喘/肺炎诊断标准。排除于试验2周内使用过免疫调节药物的患儿；排除合并严重心肺肝肾疾病的患儿；排除自身免疫性疾病、血液性疾病、传染性疾病的患儿；由患儿的监护人签署了关于本次试验的知情同意书[3]。另选择同时期的正常体检小儿30例作为对照组，其中男20例，女10例，年龄在2至9岁之间，平均年龄为(5.6±1.5)岁。纳入及排除标准：于试验前2周内身体健康，各项生命体征及指标正常；排除严重心肺肝肾疾病、自身免疫性疾病、血液性疾病、传染性疾病的患儿；并由患儿的监护人签署了关于本次试验的知情权同意书。3组一般资料无明显差异，具有可比性。

1.2方法

早晨空腹采用肝素钠抗凝负压真空采血管抽取静脉血5mL，并于3小时内进行标本处理，采用流式细胞技术检测外周血中CD4+T细胞内细胞因子Th1、Th17及外周血中CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞的水平。所用仪器、试剂及试剂盒均由美国BD公司提供。

1.3统计学方法

采用SPSS 18.0统计软件对本次研究所取得的数据进行分析，计量资料以均数±标准差的形式对数据进行表示，采取t检验，各组试验组间给予方差分析，以P<0.05代表有统计学意义。

2结果

2.1各组外周血调节性T细胞(Treg)、Th1及Th17细胞百分比对比

与对照组相比，哮喘组CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞、CD4+IL-4+Th1及CD4+IL-17+Th17细胞百分比均增加明显，差异均具有统计学意义(t值分别为5.34、5.89、6.11，均P<0.05)。与对照组相比，哮喘组CD4+IFNγTh1细胞百分比无明显差异(P>0.05)。与对照组相比，肺炎组CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞百分比降低，差异具有统计学意义(t=4.56，P<0.05)。与肺炎组相比，哮喘组CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞、CD4+IL-4+Th1、CD4+IL-17+Th17细胞百分比均增加，差异均具有统计学意义(t值分别为6.12、6.45、6.39，均P<0.05)。与肺炎组相比，哮喘组CD4+IFNγTh1细胞百分比无明显差异(P>0.05)。见表1。

表1　各组外周血Treg、Th1及Th17细胞百分比对比

注：与对照组相比，*P<0.05；与肺炎组相比，#P<0.05。

2.2各组外周血常规检测结果对比

与对照组相比，哮喘组淋巴细胞水平降低，单核细胞、嗜酸性粒细胞水平升高，差异均具有统计学意义(t值分别为5.34、5.26、5.19，均P<0.05)。与对照组相比，哮喘组白细胞、中性粒细胞水平均无明显差异(均P>0.05)。与对照组相比，肺炎组单核细胞水平升高，差异具有统计学意义(t=4.99，P<0.05)。与对照组相比，肺炎组白细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞水平均无明显差异(均P>0.05)。与肺炎组相比，哮喘组嗜酸性粒细胞水平升高，差异具有统计学意义(t=5.29，P<0.05)。与肺炎组相比，哮喘组白细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞水平均无明显差异(均P>0.05)。见表2。

表2　各组外周血常规检测结果对比±S)

注：与对照组相比，*P<0.05；与肺炎组相比，#P<0.05。

3讨论

3.1 CD4+T细胞及淋巴细胞在哮喘及肺炎发生发展中的作用

随着医疗技术的不断发展，对免疫学的相关研究也不断深入发现包括呼吸系统在内的各个部位发生的炎症反应均与免疫反应相关，由于支气管哮喘本身就为一种由多种细胞介导的气道慢性炎症反应，其中CD4+T细胞在其发生发展过程中起到了重要的作用[4-6]。另由于小儿免疫系统相比于成人存在特殊性，且相关研究报道较少。本次研究结果显示，哮喘组的Th17较肺炎及正常对照组相比均明显升高，提示Th17在哮喘发病中占有重要地位，也有研究报道认为Th17可对小儿哮喘的发生发展起到主导型作用[7]。另外，本次研究结果显示，哮喘组较正常对照组相比CD4+、CD25+Treg水平升高，但并无明显差异，推测其原因可能是部分哮喘组患儿存在家族或自身过敏史[8]。

3.2 CD4+T细胞及淋巴细胞在小儿哮喘、肺炎及正常对照组中的差异

在本研究中，肺炎组与哮喘组中Th1的水平并无明显差异，与正常组CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞百分比降低，但与肺炎组相比，哮喘组CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞、CD4+IL-4+Th1、CD4+IL-17+Th17细胞百分比增加，结果提示，Th17上调的趋势相比于哮喘组并不明显，调节性T细胞的变化与哮喘的发生发展呈现出反方向的趋势，但由于体内细胞与细胞、细胞与因子、因子及因子之间存在较为复发的变化，同时也有部分细胞因子在受到病原体刺激后表现为分泌时项的改变，从而出现了上述结果。

3.3血常规检查在在小儿哮喘、肺炎诊断中的重要性

另外，在以往的临床工作中，绝大多数临床医师仅重视白细胞、红细胞、血小板、淋巴细胞而忽略了单核细胞、嗜酸性粒细胞的水平。但本研究结果显示，哮喘组、肺炎组患儿与正常对照组的血常规结果也存在明显差异，表现为与对照组相比，哮喘组淋巴细胞水平降低，单核细胞、嗜酸性粒细胞水平升高；与对照组相比，肺炎组单核细胞水平升高；与肺炎组相比，哮喘组嗜酸性粒细胞水平升高。可见，单核细胞、嗜酸性粒细胞与哮喘及肺炎的发生及发展同样具有一定的相关性，对于炎症性疾病及过敏性疾病的疾病同样具有突出的临床意义[9-10]。这就需要临床医师结合患者的病情及其血常规结果及免疫学结果共同对疾病作出合理的分析与判断，以便为下一步临床治疗提供重要的科学基础[11]。

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[11]Liu L, Johnson H L, Cousens S,etal.Global, regional, and national causes of child mortality: an updated systematic analysis for 2010 with time trends since 2000[J].Lancet,2012,379(9832):2151-2161.

[专业责任编辑：侯伟]

[收稿日期]2015-12-01

[作者简介]李文良(1975-)，男，主治医师，主要从事儿科疾病的诊疗工作。

[通讯作者]高亮，副主任医师。

doi:10.3969/j.issn.1673-5293.2016.07.025

[中图分类号]R725.6

[文献标识码]A

[文章编号]1673-5293(2016)07-0861-03

CD4+T cells and lymphocyte subsets levels in children with asthma and pneumonia and their clinical significance

LI Wen-liang,Gao Liang

(1.Department of Pediatrics, Dongying City Guangrao County Hospital, Shandong Dongying 257300, China;2.Department of Pediatrics, Guangrao women and children’s Hospital，257300)

[Abstract]Objective To probe into and analyze CD4+ T cells and lymphocyte subsets levels in children with asthma and pneumonia and their clinical significance. Methods From September 2013 to September 2015 34 children with asthma were selected in asthma group and 33 children with pneumonia in pneumonia group from Dongying City Guangrao County Hospital. At the same period another 30 normal children taking physical examination were chosen in control group. Before breakfast 5mL blood were sampled from venous for all cases in three groups in the morning and processed within 3 hours. Then flow cytometry was used to detect Th1, Th2 and Th17 in CD4+T cells and levels of CD4+CD25+ FOXP3+ in peripheral blood. Results Compared to the control group, cell percentages of CD4+CD25+FOXP3+ , CD4+IL-4+Th1 and CD4+ IL-17+Th17 increased in the asthma group with significant differences (t value was 5.34, 5.89 and 6.11, respectively, all P<0.05). Compared to the control group, CD4+CD25+FOXP3+ cell percentage decreased in the pneumonia group with significant difference (t= 4.56, P<0.05). Compared to the pneumonia group, in the asthma group CD4+ CD25+ FOXP3+ , CD4+ IL-4+Th1, CD4+ IL-17+Th17 cell percentages increased with significant differences (t value was 6.12, 6.45 and 6.39, respectively, all P<0.05). Compared to the control group, lymphocyte levels dropped, monocytes and eosinophils levels increased in the asthma group with significant differences (t value was 5.34, 5.26 and 5.19, respectively, all P<0.05), and monocytes levels increased in the pneumonia group with significant difference (t=4.99, P<0.05). Compared to the pneumonia group, eosinophil levels increased in the asthma group with significant difference (t= 5.29, P<0.05).Conclusion CD4+T cells and lymphocyte subsets detection is of great importance in the diagnosis and identification of pediatric asthma and pneumonia disease, which provides basis for clinical treatment.

[Key words]CD4+T cells; lymphocyte subsets; childhood asthma; pediatric pneumonia