一种甘薯新病害的初步研究

宋红++张志超++杨俊誉++徐可成++黄琼

摘 要：对山东鲁东南地区窖藏的甘薯种薯进行调查时发现，每个窖的甘薯发病率均在50%左右。其典型症状表现为甘薯表面有黑色凹陷的病斑，并随着窖藏时间的延长，其病斑面积不断扩大，严重时不能食用。对坏死的病斑组织进行病原物分离，纯化培养后，按照柯赫氏法则进行接种试验，将病原鉴定为链格孢菌（Alternaria sp.）。该文对其病害的症状、病原形态、发病情况等进行研究，确定为甘薯的一种新病害。

关键词：甘薯；新病害；链格孢属；山东省

中图分类号 S531 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2016）11-0021-03

Preliminary Study on a New Disease of Sweet Potato

Song Hong et al.

（College of Plant Protection，Yunnan Agricultural University ，Kunmimg 650201，China）

Abstract：A survey was done on the store sweet potato in southeast Shandong，and then a new disease was found on them.The disease infested more than 50 percent of them and occurred commonly.The typical symptom was black sunk spots on the surface of the sweet potato.With the time extended，more spots got into one big spot.When it got heavy disease，it can not be used as food.The diseased tissue was cultured on the PDA culture medium，the Alternaria sp.was gotten.Then the next step was to inoculate on the sweet potato，at last Alternaria sp.was identified.The disease symptom，the pathogeny and the situation of the disease were gave a detailed research，the disease was identified as the new disease of sweet potato in China.

Key words：Sweet potato；New disease；Alternaria sp.；Shandong Province

甘薯（Ipomoea batatas Lam）是山东丘陵地区一种主要粮食作物[1]，是该地区淀粉加工和牲畜饲料的主要原料，大部分地区都有种植，其含热量高，富含维生素、矿物质、纤维素等多种人体所需的营养物质。现在甘薯作为保健佳品已经得到广泛承认，近些年我国的甘薯种植面积稳中有升。甘薯在生长和窖藏的过程中发生多种病害，主要有甘薯黑斑病[2-3]、茎线虫病、干腐病等。根腐病[4-6]、软腐病[7-10]等。其中，生理性病害主要是由低温引起的冻害；贮藏期病害可造成甘薯烂窖，其损失约占贮藏量的10%。甘薯茎线虫病、甘薯根结线虫病、甘薯瘟病等，都严重威胁甘薯的正常生长。在甘薯稳产、高产栽培过程中，安全贮藏是丰产、保产的重要环节。薯块发生该病变苦，就像黑斑病难以食用一样。2005年在对山东省邹城市农村窖藏的甘薯进行调查的过程中，发现贮藏的甘薯有黑斑状的发病症状（图1），此病害年年发生，有些年份发病较轻，有些年份较重。作者对窖藏发病的甘薯块茎进行了采集、分离，发现该病是由一种链格孢属病原真菌引起的。查阅国内文献资料，未见相关报道。现将鉴定结果报道如下：

1 材料和方法

1.1 标本的采集 病害采自山东省邹城市官庄村窖藏的发病甘薯，用PDA进行组织分离培养。

1.2 菌株的分离 将感病组织的病建交界处用清水冲洗干净后，用灭菌手术刀切取病健交界3mm×4mm小块组织，经70%酒精溶液消毒10～30s，再用0.1%的升汞消毒3min，用灭菌水漂洗3次，每次浸泡3min，用（高压灭菌）滤纸吸干水后移到PDA培养基，置于25℃恒温培养箱中培养。然后，观察所获得菌落，记录各菌株菌落形态、孢子形状、大小，拍照并记录观察结果。

1.3 菌株的纯化 从菌落边缘挑取少量菌丝移植于PDA培养基平板上，再从移植的菌落边缘挑取菌丝，移入另一PDA平板上，重复上述操作直到获得纯菌落。

1.4 菌株的保存 菌种短期保存采用低温保存。将在PDA平板上纯化培养的菌丝体移入PDA斜面，25℃恒温培养箱培养3d，于4℃冰箱中保存。

1.5 菌株的致病性测定 用分离到的病原菌接种甘薯，一是用孢子悬浮液针刺接种薯块；二是用孢子悬浮液涂片接种薯片。针刺接种薯块：选取中等大小（100～250g）的薯块，用清水洗净，放入0.1%的次氯酸钠中浸泡10min，然后用灭菌水冲洗3次，每次3min，取出凉干后，在薯块中部占全薯块1/2的部位，用直径约2mm的圆钉刺入薯皮3～4mm深度，刺孔位置尽可能选择比较光洁的表面，每个薯块刺孔3～5个。采用传统方法制备孢子悬浮液，用微型注射器往刺孔内注入新鲜的孢子悬浮掖。浓度是100倍显微镜下观察，每个视野平均含60个孢子，每个刺孔注入孢子液容量5～10μL（图3）。涂片接种薯片：将块根切成2～3cm厚的圆片，将孢子涂于两侧。每次试验均应设置对照最少各4个。将接种后的薯块放入白瓷盘中，盘内放入泡水棉花的小培养皿，盘外罩塑料薄膜，以保持较高的相对湿度（95%以上）。把罩好的白瓷盘置于27～28℃的恒温箱中7d后，取出观察，测量病斑的平均直径。从接种发病病块上分离到菌落形态、菌体形态和接种真菌相同的真菌。

2 结果与分析

2.1 病原分离 先后分离带病薯块3批，均得到同一病原菌，后经形态学鉴定为链格孢菌（Alternaria sp.）。

2.2 致病性测定 致病性测定结果：接种后7d发病，回接成功率均为100%，重新分离均获得原接种病菌。

2.3 病原菌的鉴定[12-13]菌落铺展，暗褐色或黑色；菌丝褐色，很少形成子座。分生孢子梗分化不明显，不规则稀疏分枝，淡褐色；分生孢子，串生，砖格状，2～6个横隔，3～8个纵隔；顶部有喙状细胞，孢子大小差异悬殊，（40～216）μm×（20～24）μm（图2）。经形态学鉴定及致病性测定，确认病原菌为链格孢菌（Alternaria sp.）.

3 小结与讨论

以山东鲁东南地区窖藏种薯上采集到的病块为材料，经分离获得病原菌，再经致病性测定，病原菌形态学，培养性状观察等，确认病原菌为链格孢菌（Alternaria sp.）。带病的甘薯症状表现为，带有明显边缘的、褐色或黑色、塌陷的斑点，发病初期，甘薯表面出现黑色斑点；随着时间的延长，圆形病斑逐渐扩大，到最后通体变黑；如果湿度较大，则腐烂难闻。黑色病斑纵向抛开表现为暗褐色，质地坚硬。在过去很长一段时间里，人们一直误认为是由甘薯长喙壳引起的黑斑病。但经我们研究发现：该病是由链格孢菌引起，在潮湿的条件下，会长出稀疏的白色菌丝，不会长出带喙的子囊壳。

该病害是山东地区窖藏的一种主要病害，一旦条件适宜，即可大范围内发生严重流行，造成烂窖的发生。并且带有病斑的甘薯煮熟后，味道十分苦涩，不能食用。国内还没有相关报道，因此相关部门应予以高度重视，积极开展抗病育种工作。对该病的发生规律及防治需进一步的深入研究。

参考文献

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[13]张中义.病原真菌学[M].成都：四川科学技术出版社，1988，376-377. （责编：吴祚云）