牙周炎常见菌对抗菌药物的筛选及活性测定探讨

王金海（中国人民解放军第四六三医院口腔科，辽宁 沈阳 110000）

牙周炎常见菌对抗菌药物的筛选及活性测定探讨

王金海
（中国人民解放军第四六三医院口腔科，辽宁 沈阳 110000）

目的 通过对牙周炎常见菌对抗药物的筛选及活性测定，分析探讨治疗不同类型牙周炎的最佳药物。方法 采用NCCLS推荐的液体稀释法对牙周炎常见菌进行药物测定，测出最低抑菌浓度（MIC）。结果 克林霉素、二甲胺四环素、环丙沙星这三种抗生素对牙周炎常见菌抑菌效果最好，其中尤以二甲胺四环素的效果最为突出。结论 临床上治疗牙周炎时可将二甲胺四环素作为最佳药物。

牙周炎常见菌；对抗菌药物；筛选；活性测定

局部因素所引起的牙周支持组织产生的慢性炎症即为牙周炎。该病多分布在35岁以后的年龄阶段，如患者不及时治疗，炎症就会逐渐向深层扩散到牙周膜、牙槽骨、牙骨质，从而发展成牙周炎［1］。本次研究对牙周炎常见菌进行了抗菌药物的筛选与活性测定，具体报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

1.1.1牙周炎常见菌。牙周炎常见致病菌株：①国际标准菌株：卟啉单胞菌（牙龈卟啉单胞菌、不解糖卟啉单胞菌、牙髓卟啉单胞菌）、普氏菌（中间普氏菌、卢氏普氏菌、躯体普氏菌）、放线菌（伴放线杆菌、黏性放线菌、内氏放线菌）、嗜二氧化碳菌（牙龈嗜二氧化碳菌、黄褐色嗜二氧化碳菌）、血链球菌、嗜沫嗜血杆菌、巨核梭形杆菌、韦荣氏球菌；②药敏指示菌：多形类杆菌、脆弱类杆菌；③分离菌株，主要为从临床上牙周炎患者牙周袋内鉴定、分离的菌株，包括18株类杆菌、56株放线菌、82株产黑色素菌群、57株梭形杆菌、13株伴放线杆菌、12株嗜沫嗜血杆菌、10株韦荣氏球菌、15株其他厌氧菌。

1.1.2牙周炎抗菌药物。本次研究共选用18种牙周炎抗菌药物：四环素类（强力霉素、二甲胺四环素）、大环内酯类（克拉霉素、罗红霉素、红霉素、麦白霉素、阿奇霉素、交沙霉素、乙酰螺旋霉素）、硝咪唑类（替硝唑、甲硝唑）、喹诺酮类（曲氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、左旋氧氟沙星、诺氟沙星、洛美沙星）、克林霉素。

1.1.3培养基：选择放线菌、伴放线放线杆菌、梭形杆菌、产黑色素菌群作为培养基。

1.2方法

1.2.1对抗菌药物的筛选。①配置细菌悬液：在固体CDC培养基上接种上述国际标准菌株，采取厌氧培养，并保持温度在37 ℃，5 d后即在液体培养基中置于新鲜细菌菌落，继续进行厌氧培养，2 d后再把液体CDC培养基稀释到一定浓度留置待用。②配置药敏培养基：对18种牙周炎抗菌药物进行稀释，由浓到稀分为13个浓度，把55 ℃混有5%羊血的CDC培养基与1 mL药液加14 mL的培养基进行混合，分置到13个实验器皿中，并设两个无药培养基以进行对照。③细菌点种：把稀释好的菌液用点种仪分先后点种到其中一个空白培养基和药敏培养基上，进行先前对照观察；13个浓度的药敏培养基点种完后，再把菌液点种到另一个空白培养基上，进行后对照。将器皿放置到35 ℃的厌氧环境中进行培养，5 d后观察最低抑菌浓度（MIC）。

1.2.2对抗菌药物的活性测定：①用选择培养基对牙周炎患者牙周袋内取下的龈下菌斑进行致病菌株的培养；②用分离的263株致病菌进行细菌悬液的配置；③选用经对抗菌药物筛选试验后的三种效果最好的抗生素进行药敏培养基的配置；④进行细菌点种；⑤分析观察263株临床分离的菌株对三种抗生素的药物活性。

1.3结果判断：针对对抗菌药物的筛选，平均血药浓度＜MIC即为耐药，MIC≤平均血药浓度＜MIC的5倍即为中度敏感，平均血药浓度≥MIC的5倍即为高度敏感；针对对抗菌药物的活性测定，用平均血药浓度分别与90%抑菌范围、50%抑菌范围、有效抑菌范围（MIC）进行比较。

2　结 果

通过对牙周炎常见致病菌进行药物的筛选试验后取得了克林霉素、二甲胺四环素、环丙沙星这三种抑菌效果最好的抗生素，并用临床分离的263株菌株进行了药物活性的测定，得出了90%抑菌范围、50%抑菌范围、有效抑菌范围（MIC）。

其中二甲胺四环素的抑菌效果最好，除了对产黑色素菌群的有效抑菌范围在0.06～64 mg/L，对其他菌株的抑菌活性范围（MIC）均＜0.06～64 mg/L；克林霉素对类杆菌、放线菌、产黑色素菌群、梭形杆菌的有效抑菌范围相同（＜0.06或＞256 mg/L），对其他菌株的有效抑菌范围则不同；环丙沙星则对类杆菌、韦荣氏球菌的有效抑菌范围相同（＜0.06～16 mg/L），对其他菌株的有效抑菌范围都不同。

3　讨 论

牙周炎是由特定的可疑致病菌所引起的慢性感染性疾病，牙龈卟啉单胞菌、伴放线杆菌、福赛类杆菌这三类均属于革兰阴性杆菌、具有多种毒力因子的牙周致病菌已被世界牙周病研讨会所公认［2］。在大部分研究中，黄褐色嗜二氧化碳菌、伴放线杆菌是导致青少年患上牙周炎的主要致病菌，其中克林霉素、二甲胺四环素、强力霉素、环丙沙星对它们有较高的敏感性。而中间普氏菌、牙龈卟啉单胞菌、巨核梭形杆菌、黏性放线菌则是导致成年人出现牙周病的主要原因，克林霉素、二甲胺四环素、环丙沙星这三种抗生素对他们的敏感性最高［3］。

本次试验中得出的抑菌效果最好的三种抗生素中尤以二甲胺四环素的抗菌效果最好，它是一种半合成的四环素类抗生素，与同类其他药物相比，具有更广的抗菌谱，抑菌作用更强，因此可作为临床上治疗牙周炎的首选药物。

［1］ 杨暤.茶多酚联用奥硝唑对牙周可疑致病菌的体外抑菌活性研究［D］.重庆：重庆医科大学，2012.

［2］ 张研.克拉霉素治疗重度慢性牙周炎的基础与临床研究［D］.天津：天津医科大学，2012.

［3］ 刘晓花.派丽奥联合布洛芬治疗慢性牙周炎的临床应用研究［D］.济南：山东大学，2010.

R781.4+2

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1671-8194（2016）23-0051-01