猪瘟的实验室诊断技术

沈娜

（福建省永安市农业局366000）

猪瘟的实验室诊断技术

沈娜

（福建省永安市农业局366000）

为了有效控制我国猪瘟的流行，减少养殖户的经济损失，了解和掌握猪瘟的实验室诊断方法很重要。本文简要介绍猪瘟的实验室诊断方法和相关诊断技术。

猪瘟；实验室；诊断技术

猪瘟 (HC)具有高度接触传染性，流行广泛，发病率、死亡率高，危害极大。1984年国际兽疫局 (OIE)将之列为A类16种法定传染病之一。猪瘟是养猪业中常见的疾病，给养猪生产和发展带来了巨大的损失。因此，有必要了解和掌握猪瘟的实验室诊断方法，研究出快速、准确的诊断技术，有效控制猪瘟的扩散，减少养殖户的经济损失，为在我国彻底消灭猪瘟奠定基础。常见的实验室诊断有以下几种。

1 免疫荧光试验 (FA)

将病猪扁桃体和脾制成20g/L的混合匀浆后接种PK-15细胞，24-72h以后用FA试验或酶标抗体检查证实培养物中的病毒。此种病毒分离诊断方法较敏感。

2 间接血凝试验 （IHA）

间接血凝试验 （IHA）是将抗原或抗体包被于红细胞表面，成为致敏载体，然后与相应的抗体或抗原结合，使红细胞发生聚集，在反应孔中出现肉眼可见的凝集反应。间接血凝实验曾经是非常普遍的检测手段，它操作步骤简单，实验时间短，价格便宜，不需要特殊的检测仪器等优点，因此，在基层实验室检测中受到大力推广。不足之处是检测试剂有质量差异和不稳定性，且此类实验的结果判定依靠肉眼判断，准确性差。同时，待检血清的灭活程度也对实验结果有很大的影响。

3 酶联免疫吸附试验 （ELISA）

酶联免疫吸附实验是现阶段基层实验室最常用的检测手段，它检测手段简单，结果稳定，实验的重复性高，且检测费用适中，逐渐取代了早期推广的间接血凝实验。它既可检测抗体，也可检测抗原，检测多样性高，更适应猪场清除带毒猪只的需要。现阶段酶联免疫吸附实验主要分以间接ELISA、阻断ELISA和斑点ELISA这3种较为常见。

4 聚合酶联反应 （PCR)

聚合酶联反应是1985年由美国PE-Cetus公司人类遗传研究室的MuLlis（穆里斯）发明的。聚合酶链反应又称无细胞克隆技术，是在一定的条件下 （温度和反应酶），对某一段DNA进行体外快速复制扩增，达到肉眼可见的新技术。它具有快速、反应产量高、实验结果稳定、特异性和敏感性高等特点，是十分先进的一种检测技术。随着耐热DNA聚合酶--Taq酶的发现，该实验操作过程变的得十分简单便捷，实验的时间和人工成本都大大降低，促进的该技术的发展，使之逐步应用于基层实验室检测。

5 其他检测方法

中和试验是通过测定不同浓度的被检血清对定量的猪瘟病毒的感染力的阻止能力来判断被检血清中的抗体效价。这种方法对实验仪器的依靠性强，对实验人员检测技术的要求高，且操检测过程复杂，操作时间长，不适用基层实验室的检测工作。胶体金免疫技术是一种新型的检测技术，主要有斑点免疫金渗滤法和胶体金免疫层析技术。此类检测技术具有便捷，快速，敏感性高，结果判断直观等特点。