药理学

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RISK信号通路在β2-肾上腺素受体激动剂clenbuterol减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用

张秋芳，谭艳，汪选斌，等

目的：研究β2-肾上腺素受体激动剂clenbuterol对原代培养的心肌细胞缺氧/复氧损伤的作用及其是否与激活再灌注损伤挽救激酶（reperfusion injury salvage kinase，RISK）信号通路有关｡方法：将原代培养的新生Wistar大鼠乳鼠心肌细胞分为8组，①正常培养组；②缺氧/复氧（A/R）组；③clenbuterol（1 μmol·L-1）+A/R；④ICI118，551（10 μmol·L-1）+clenbuterol（1 μmol·L-1）+A/R组；⑤美托洛尔metoprolol（10 μmol·L-1）+clenbuterol （1 μmol·L-1）+A/R组；⑥ metoprolol（10 μmol·L-1）+A/R组；⑦PD98059（20 μmol·L-1）+clenbuterol（1 μmol·L-1）+A/R组；⑧ LY294002（10 μmol·L-1）+clenbuterol（1 μmol·L-1）+A/R组｡采用MTT法测定各组细胞存活率；比色法检测心肌细胞培养液的乳酸脱氢酶（LDH）含量；Hoechst 33342荧光染色法检测细胞凋亡率；分子探针DCFH-DA检测细胞内活性氧的水平；Western blot检测心肌细胞缺氧/复氧后ERK及p-ERK1/2蛋白的表达水平｡结果：与A/R组比较，clenbuterol+A/R组明显增高细胞存活率，降低LDH含量，降低细胞凋亡率，ROS产生减少，p-ERK1/2蛋白表达水平增高，而选择性β2受体阻断剂ICI118， 551可取消clenbuterol的上述作用，β1受体阻断剂Metoprolol对clenbuterol的作用无影响，PI3K抑制剂LY294002和ERK1/2抑制剂PD98059可阻断clenbuterol对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用｡结论：clenbuterol能够减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤，加入选择性β2受体阻断剂ICI118，551，PI3K抑制剂LY294002和ERK抑制剂PD98059均使clenbuterol的保护作用取消，表明clenbuterol可通过激动β2肾上腺素受体，激活RISK信号通路发挥抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的作用｡

clenbuterol；缺氧/复氧；心肌细胞；磷酸化ERK；PI3K；reperfusion injury salvage kinase（RISK）

来源出版物：中国药理学通报, 2015, 31(10): 1368-1374联系邮箱：张秋芳，zqf1112000@163.com