直接药敏试验在临床血液细菌检验中的效果研究

【摘要】 目的 观察和分析研究临床血液细菌检验中使用直接药敏试验的方法和效果，以提高其在血液细菌检验中的应用价值。方法 选择2013年7月～2014年7月我院收治的需要进行血液细菌检验的患者标本共96例作为研究对象，将每份标本平均分为两份，每份均做需氧和厌氧培养。其中A组使用常规药敏试验，B份使用直接药敏试验，观察比较两种方法的细菌鉴定结果、药敏试验结果，以常规药敏试验作为标准，并进行统计学分析。结果 两种方法对革兰氏阳性球菌鉴定结果无明显差异，差异无统计学意义；对革兰氏阴性杆菌检验结果中，两种方法的符合率对比差异不明显，差异无统计学意义。抗生素敏感性方面，直接药敏试验与常规药敏试验对比差异不明显，差异无统计学意义。两种方法检验所需时间对比差异明显，差异有统计学意义。结论 在临床血液细菌检验中使用直接药敏试验的检验结果与常规药敏试验无明显差别。

doi:10.3969/j.issn.1674-9316.2015.04.019

工作单位：114000鞍山市肿瘤医院检验科

Direct Drug Susceptibility Test in Clinical Blood Test the Effects of the Bacteria

LI Li The clinical laboratory，Anshan cancer hospital，Anshan 114000，China

【Abstract】

Objective To observe and analyze the clinical blood bacteria test used in the method and effect of drug sensitive test directly, in order to improve the application value of bacteria in the blood test. Methods July 2013 to July 2014, our hospital of the need for blood specimens from 96 patients with bacterial test as the research object, the average each specimen is divided into two, each doing aerobic and anaerobic culture. Using conventional drug susceptibility test of group A, B A, medicine sensitive experiment using direct observation comparison of the two methods bacteria identification and drug susceptibility test results, with conventional drug susceptibility test as the standard, and statistical analysis. Results Two methods of gram positive coccus no difference between the appraisal result, there was no statistically significant difference; In the gram-negative bacillus test results, the coincidence rate of two methods contrast difference is not obvious, there was no statistically significant difference. Antibiotic susceptibility, direct drug susceptibility test no obvious difference compared with conventional drug susceptibility test, there was no statistically significant difference. Two methods of time needed for inspection comparison difference to be markedly, the difference was statistically significant. Conclusion In clinical blood bacteria test with the test result of the direct drug susceptibility test and conventional drug susceptibility test has no obvious difference.

【Key words】Direct drug susceptibility test，Blood bacteria inspection，The effect

直接药敏试验是指直接用样本或增菌培养液涂抹药敏试验平板，粘贴药敏纸片，并经35℃孵育培养16～24 h后直接量取抑菌环的方法。它只是参照标准纸片琼脂扩散法（K-B法）操作程序的一种特殊操作程序，并不是通用的药敏试验方法。70年代国外便有学者将其应用到小便培养和血培养增菌液的直接药敏试验中。它的最大优点是比传统的药敏试验方法结果提前24 h，这对于新生儿感染或一些危重感染病例的抗感染治疗有一定的参考意义 ［1］。

1 资料及方法

1.1 一般资料

选择2013年7月～2014年7月我院收治的需要进行血液细菌检验的患者标本共96例作为研究对象，患者中男48例，女48例，年龄8～76岁，平均为（48.96±18.56）岁。患者在血液采集前48 h内没有使用药物和其他治疗，无凝血功能障碍和血液系统疾病。

1.2 方法

将每份标本平均分为两份，每份均做需氧和厌氧培养。其中A组使用常规药敏试验，B份使用直接药敏试验，观察比较两种方法的细菌鉴定结果、药敏试验结果，以常规药敏试验作为标准。

1.3 统计学处理

采用数理统计软件SPSS 19.0对收集的数据进行整理与统计分析，并进行卡方检验，P<0.05显著差异具有统计意义。

2 结果

两种方法对革兰氏阳性球菌鉴定结果无明显差异，差异无统计学意义；对革兰氏阴性杆菌检验结果中，两种方法的符合率对比差异不明显，差异无统计学意义。抗生素敏感性方面，直接药敏试验与常规药敏试验对比差异不明显，差异无统计学意义。两种方法检验所需时间对比差异明显，差异有统计学意义。

3 讨论

直接药敏试验即在分离培养病原体的同时，直接将临床标本接种于平板，用抗生素纸片作药物敏感试验，在18～24 h内可获得结果。该法的优点为快速，接受标本后次日即可发出报告；可在同一种细菌中鉴定出敏感株和耐药株，也能在大量敏感细菌中发现少量耐药菌 ［2］。如化脓性链球菌出现在庆大霉素抑菌圈内，铜绿假单胞菌在氨苄青霉素抑菌圈内 ［3］。这种方法的不足之处在于试验时接种量难以标准化，而且对混有杂菌和混合感染的标本不易明确其结果。因而对正常无菌部位采集的血、尿、脓等标本，其直接药敏试验的可靠性较好；在有正常菌群部位采集的标本，除非显微镜检查提示为单一病原菌感染外，一般可不做。如在混合培养中有一种以上菌株在直接药敏试验呈不同程度抑菌或无抑菌圈，评定结果时必须谨慎，应考虑有其他细菌产生的β-内酰胺酶所引起的对混合感染及污染标本中敏感菌的作用。在直接药敏试验以后，待分离出纯培养，再用纯菌（控制接种量）作药敏试验。分离出来的细菌原则上应经细菌形态、菌落特点、生化反应、血清学试验、动物接种等鉴定。目前动物接种除白喉棒状杆菌外已很少用于鉴定。临床微生物学要求尽快地作出检验结论，应根据掌握的资料，选择可靠而适用的特征作为鉴定指标；不可能也不必要对每一份标本分离株作出全面鉴定。一些微量鉴定系统，因其快速、简便，值得推广应用。对于许多革兰阴性菌鉴定用商品化试剂盒只需4 h孵育，多数情况下微生物鉴定可在标本接种后24 h内完成。直接药敏试验虽然可以在病原体鉴定以前提供药物敏感性结果，以便临床用药参考，而且根据细菌的耐药谱亦有助于细菌的鉴定；但为了证实和提高标本试验的准确性，应在分离纯培养后，以纯种作体外药物敏感试验，包括抑菌试验、杀菌试验、联合药敏试验和检测细菌所产生的抗生素灭活酶等。临床微生物学工作者应与临床医生密切配合，接受有关合理使用抗生素的咨询，根据实验室试验结果及病人病情和实际状况确定治疗方案。在临床血液细菌检验中使用直接药敏试验的检验结果与常规药敏试验无明显差别，是一种较好的检验方法。