三元复合乳酸菌剂在哺乳仔猪中的应用效果

雷 彬林开春宋忠旭孙 华李明波董斌科彭先文梅书棋*

1.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所，武汉 430064；2.湖北绿天地生物科技有限公司，武汉 430064

三元复合乳酸菌剂在哺乳仔猪中的应用效果

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1.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所，武汉 430064；2.湖北绿天地生物科技有限公司，武汉 430064

为了探讨益生菌在哺乳仔猪中的使用效果及最佳的使用方式，利用5个试验分组研究了三元复合乳酸菌剂对仔猪腹泻及生长性能的影响。结果表明，饲喂三元复合乳酸菌剂能有效减少腹泻，仔猪出生时口服0.05 g/mL的三元复合菌剂0.5～1.0 mL，以后每天上午和下午给母猪奶头喷雾10 mL菌液能显著减少腹泻（P＜0.05）。

益生菌；仔猪；腹泻

近年来，随着养猪业的集约化、规模化发展，哺乳仔猪腹泻的发病率和死亡率越来越高，给养猪业造成了很大的经济损失。

抗生素一直是预防和治疗仔猪腹泻的主要途径，它能够在一定程度上抑制病原菌的繁殖，但同时也会影响肠道内正常菌群的生长，长期使用易引起消化道疾病[1]。另外，抗生素的滥用造成的严重后果已引起广泛的关注，耐药菌株的数量不断增加，抗药性不断增强。最后，由于抗生素的不规范使用，畜禽体内的药物残留已严重威胁到人类自身的健康。目前，许多国家已制定相关法律来限制抗生素的用量及禁用。

微生态制剂是一类无毒、无害、无残留并能有效抑制病原菌的促生长制剂，是理想的抗生素替代物[2]。作为微生态制剂的重要组成，益生菌在维持肠道的菌群平衡、抑制病原菌的生长、增强机体免疫和促进动物生长等方面发挥着重要作用[3-4]。同时，研究发现复合菌株或菌种比单一菌株的益生作用更好[5]。

鉴于此，开展了复合益生菌制剂对哺乳仔猪的使用效果分析试验。

1 材料与方法

1.1 试验菌剂

由湖北绿天地生物科技有限公司提供，为200 亿/g水溶性三元复合乳酸菌（屎肠球菌、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌）粉剂，使用时用纯净水以1 g∶20 mL的比例稀释。

1.2 试验动物与试验方案

试验于2013年10月至12月在湖北省农业科学院畜牧兽医研究所原种猪育种场进行。从该场选择出生日龄相近（3 d内）的大白仔猪5窝，每窝仔猪数量不低于8头，试验期从出生至15日龄，试验分空白对照组、试验I组、试验II组、试验III组，每组为1窝仔猪。空白对照组给母猪奶头喷水10 mL；试验I组对母猪奶头喷雾10 mL菌液；试验II组第1天给每头仔猪口腔喷雾0.5 mL菌液，以后改为每天对母猪奶头喷雾10 mL菌液；试验III组给仔猪每头口腔喷雾0.5 mL菌液；另选1窝仔猪组内随机分为2组，试验IV组对仔猪每头口腔喷雾0.5 mL菌液，试验V组对仔猪每头口腔喷雾0.5 mL水。每天上午和下午各进行1次试验处理，一直到第15天，记录初生重、15日龄体重、21日龄体重、腹泻情况及精神状态，并进行1次重复试验。

表1 第1次试验仔猪总体情况结果

表2 重复试验仔猪总体情况观察

1.3 数据统计分析

试验数据录入Excel表格，采用SAS软件进行方差分析和显著性检验，增重效果采用模型：Yijk= μ+Ti+aijXij+eijk

其中，Yijk为15日龄或21日龄个体重，μ为平均值，Ti为处理效应，以出生个体重Xij为协变量，aij为其回归系数，eijk为随机误差。

2 结果与分析

2.1 仔猪总体情况观察

表1、表2为2次试验各试验组仔猪的增重、腹泻情况等的观察结果。

如表1所示，第1次试验过程中没有出现红痢和白痢，试验II组和试验III组的情况较好，没有出现腹泻（黄痢），且仔猪毛色光亮，精神活跃，而空白对照组的腹泻情况较多，并有1头仔猪因腹泻死亡。另外，组内分组的结果也显示喷水组的腹泻情况明显多于喷菌组。

如表2所示，重复试验中，由于母猪在产前进行了腹泻疫苗的免疫，猪群整体状态很好，仔猪毛色光亮，精神活跃。试验V组有少量腹泻发生，进一步说明三元复合菌剂对减少腹泻有一定的效果。

2.2 仔猪腹泻情况分析

采用SAS软件对试验中仔猪的腹泻比例进行卡方检验，结果见表3，图1为仔猪腹泻比例的柱形图分析。

从表3和图1可以看出，空白对照组的腹泻比例明显高于其他组，并与试验II组差异显著（P＜0.05）。由于样本含量偏少，虽然卡方检验的结果只有试验II组与空白组的腹泻比例达到了显著性水平，但还是可以从图中看出添加三元复合菌剂的处理组的腹泻比例较少。重复试验中，由于猪群整体状态较好，不能较好地显示益生菌的使用效果。

表3 第1次试验仔猪腹泻比例卡方检验结果

图1 第1次试验仔猪腹泻比例柱形图（*P＜0.05）

2.3 仔猪增重情况分析

将初生重作为协变量，分析试验处理对仔猪增重的影响，结果见表4（数值以平均数±标准差表示），显著性检验结果见表5。

表4 第1次试验各处理对增重的影响 kg

表5 第1次试验的显著性检验结果

由表4、表5可见，益生菌的处理组与空白对照组对增重的差异不显著。另外，重复试验的分析结果也显示增重差异不显著（数据未列出）。

3 讨论与结论

3.1 三元复合菌剂对哺乳仔猪腹泻的影响

在第1次试验中，空白组的腹泻比例要高于其他各组，且有1头仔猪因腹泻死亡。试验II组和试验III组没有出现腹泻，并且试验II组的卡方检验达到了显著性水平（P＜0.05）；其余几组腹泻比例低于空白对照组，但由于样本含量偏少，卡方检验差异不显著。另外，组内分组的结果也揭示喷菌组的腹泻比例较低，这些结果都表明复合菌剂对减少仔猪腹泻有一定的效果。在后续试验中，需加大实验的样本含量，进一步验证符合菌剂的使用效果。由于猪场进行了腹泻苗的免疫，在重复试验中的仔猪整体状态较好，基本没有出现腹泻，各组腹泻比例无显著性差异。对比2次试验，在益生菌的功能研究试验中，应尽量选择腹泻比例较高的猪群进行试验，能更好地反映出效果差异。

3.2 三元复合菌剂对哺乳仔猪增重的影响

通过增重模型分析发现复合菌剂对哺乳仔猪增重并无显著影响，重复试验的结果与第1次试验结果一致。这可能是由于在每天的试验处理过程中对仔猪存在较大的应激，干扰了最后的增重试验结果。

试验所用益生菌为三元复合菌剂，包括屎肠球菌、粪肠球菌和嗜酸乳杆菌。在正常情况下，屎肠球菌和粪肠球菌主要分布在猪的空肠和回肠中，而嗜酸乳杆菌在小猪的胃、小肠等处都有分布[6]。屎肠球菌能够提高仔猪早期肠道微生物的定植，降低病原菌的数量[7-8]。乳酸菌可竞争性地抑制病原菌对肠黏膜的粘附，从而降低病原菌对宿主的侵害[9-10]。添加乳酸菌能大幅度地减少粪便中大肠杆菌的比例，提高动物的抵抗力[11]。此外，嗜酸乳杆菌能分泌抗生素类物质，对肠道致病菌产生拮抗作用，抗菌肽能有效地抑制大肠杆菌DNA的合成[12]，过氧化氢能抑制葡萄球菌的生长繁殖[13]，此外还有嗜酸乳菌素、嗜酸杆菌素、乳酸菌素等。最后，乳酸菌还能够激活巨噬细胞、B淋巴细胞和NK细胞，增加IL-1、IL-2、IL-6、IL-5，TNF-α等细胞因子的产生量[14]。

仔猪出生时肠道内是无菌的，之后由于受到母体产道、粪便及环境微生物的影响，在出生后的3～4 h，肠道内开始检出大肠杆菌和链球菌。试验II组和试验III组没有出现仔猪腹泻，试验效果较好，这可能是由于在仔猪出生后立即口服复合菌剂，可以加快消化道有益微生物的定植，减少病原微生物的数量，对仔猪起到较好的保护作用。同时，复合菌剂也在后期发挥了抑制细菌和增强免疫的作用，抑制了病原菌的入侵。

猪肠道内的正常微生物与宿主是共生关系，宿主为微生物提供适宜的生存环境，同时微生物会为宿主提供一些消化酶、氨基酸、维生素、多糖等。研究表明，枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌具有较强的淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶活性，同时还具有降解非淀粉多糖的酶类，如纤维素酶、葡聚糖酶、果胶酶等[15]。同时，益生菌在宿主肠道内能产生多种营养物质，包括B族维生素、维生素K、氨基酸、促生长因子等[16]。有研究报道在仔猪日粮中添加乳酸菌，平均日增重提高了20.5%（P＜0.05），料肉比下降了20.5%（P＜0.05）[17]。另外，屎肠球菌能提高仔猪的生长、免疫和抗氧化性能，添加屎肠球菌的仔猪免疫和抗氧化性能显著提高，同时日增重提高11.46%（P＜0.05），料肉比降低6.20%（P＜0.05）[18]。本次试验中各试验组与空白对照组的增重差异不显著，同时组内分组之间的差异也不显著，排除了母猪效应对试验的影响。因而，可能是由于每天对仔猪进行2次试验处理，在饲喂复合菌剂的过程中对仔猪的应激较大，影响了仔猪的增重。在后续的试验中需要剔除试验操作应激对仔猪生长性能的影响。

综上分析得出，三元复合菌剂对减少哺乳仔猪腹泻具有一定的效果，在使用方法上，建议采用初生时口服0.05 g/mL的三元复合菌剂0.5～1.0 mL，以后每天用量不变，利用饮水添加，减少应激，最大限度地发挥益生菌的抗菌促生长作用。

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2015-10-29

湖北省公益性科技研究项目（2014BBB014）；国家生猪产业技术体系项目（CARS-36）；湖北省农业科技创新中心创新团队项目（2011-620-001-003）；国家科技支撑计划（2014BAD20B00）

*通讯作者

雷 彬，男，1987年生，研究实习员，硕士，研究方向：猪遗传育种。