生鲜乳快速检测技术及常用方法

申惠敏1，贾秀珍2

（1.山西省长治市畜牧兽医局，山西长治046000；2.山西省长治市城区农林委，山西长治046000）

近些年来，相关政府机构做了大量工作改造收奶站，以质论价，严厉打击掺假使假，使鲜奶质量有了明显改善。但鲜奶掺假是一个普遍存在的问题，这些行为不仅严重影响了鲜奶的营养品质，也危害了消费者的健康，如何提高原料奶的质量仍是一个值得注意的问题。

生鲜乳是液体乳、乳粉和其他乳制品的源头，其质量好坏非常重要，直接影响乳制品质量安全。以下是常见的生鲜乳快速检测技术及方法：

1 碱类物质快速检测

1.1 牛奶中掺碱类物质的危害 在牛奶中掺入碱类物质的目的是为掩盖牛奶酸败现象、中和牛奶中的乳酸、降低牛奶酸度、防治牛奶因酸败而凝结；通常以掺纯碱（Na2CO3）或小苏打（NaHCO3）为多。加碱后牛奶口感差，而且便于细菌的生长，同时破坏牛奶中某些维生素。

1.2 掺碱快速检测原理 正常牛乳呈微酸性，加碱后变为碱性，可使溴麝香草酚蓝指示剂变色，由颜色深浅的不同，判断加碱量的多少。此法既简便、快速，又灵敏。奶站、乳制品生产企业多采用酸度滴定法、溴麝香草酚蓝试管法或溴麝香草酚蓝试纸法。目前我国执行的标准是《乳与乳制品卫生标准的分析方法》GB/T 5009.46-2003（即溴麝香草酚蓝试管法）。

1.3 快速检测步骤 配制0.4 g/L溴麝香草酚蓝-乙醇溶液，变色范围 pH 6.0～7.6（黄→蓝），反应很灵敏，加入少量的碱就可以使该指示液变色，如果含碱过多颜色就加深至深青色。量取5mL试样，置试管中，将试管保持倾斜位置，沿管壁小心加入5滴溴麝香草酚蓝-乙醇溶液；将试管轻轻倾斜转2～3圈，使其更好地相互接触，切勿使溶液相互混合，然后将试管垂直放置，2min后根据环层指示剂颜色的特征确定结果；同时用未掺碱的鲜乳做空白对照试验，或者用小苏打配制的阳性样品进行对照。

2 生鲜乳β-内酰胺类快速检测

2.1 检测步骤 调节孵育器温度至56℃；将牛奶样品摇匀；取出相应数量的检测条，水平放置在孵育器上，小心揭开贴膜至指示线处；用移液器取300μL牛奶样品，缓慢竖直滴加至检测条的凹槽中；将贴膜重新封好，可同时操作四个样品，要在60 s内完成四个样品的操作；盖上孵育器塑料盖，自动开始倒计时；孵育8min结束后，蜂鸣器响动，取出检测条，3 min内判读结果。

2.2 判读标准 首先查看控制线（C线），如果不显色，本次检测结果无效。在控制线（C线）正常显色的情况下，按以下标准判断结果：

如果检测线（T线）的颜色和控制线（C线）的颜色一致或者比控制线颜色深，则判断样品为阴性。如果检测线（T线）的颜色不可见或者比控制线（C线）颜色浅时，则判断样品为阳性。

3 生鲜乳β-内酰胺酶类快速检测

3.1 检测步骤 配制阳性质控溶液；调节孵育器温度至56℃；取阳性质控溶液50μL～1mL的离心管中，再加入350μL待检测样品充分混匀，静置20～30min，配成待检溶液；取出相应数量的检测条，水平放置在孵育器上，小心揭开贴膜至指示线处；用移液器取300μL已配好的待检溶液，缓慢竖直滴加至检测条的凹槽中；将贴膜重新封好，可同时操作四个样品，要在75 s内完成四个样品的操作；盖上孵育器塑料盖，自动开始倒计时；孵育8min结束后，蜂鸣器响动，取出检测条，3min内判读结果。

3.2 判定标准 首先查看控制线（C线），如果不显色，本次检测结果无效。在控制线（C线）正常显色的情况下，按以下标准判断结果：

如果检测线（T线）的颜色和控制线（C线）的颜色一致或者比控制线颜色深，则判断样品为阳性，也就是牛奶样品中含有检测限水平或者高出检测限水平的β内酰胺酶，样品中含有β-内酰胺酶可降解质控液中的青霉素G。

如果检测线（T线）的颜色不可见或者比控制线（C线）颜色浅，则判断样品为阴性，即被检的牛奶样品中不含β-内酰胺酶，不能分解质控液中的青霉素G。

3.3 注意事项 如果个别牛奶或奶粉因为乳脂或蛋白含量很高，导致检测条的质控线（C线，上面的检测线）不出现颜色，请离心后除去脂肪蛋白质再进行检测。

4 生鲜乳三聚氰胺快速检测

4.1 生鲜乳处理 用干燥、洁净的离心管或适当容器盛放样品，吸取1mL样品于离心管中，根据所需检测限检测。

4.2 检测步骤 用滴管吸取待检样品溶液，垂直滴加3～4滴（100μL）于加样孔中，加样的同时开始计时，5～10min读取结果。

4.3 结果判定 C、T线均显色。表示样品中不含有待检测物质或其浓度低于检测限；检测T线不显色，则表示样品中待检测物质浓度高于检测限；质控C线未显色，表明操作过程不正确或检测卡已失效。

4.4 注意事项 检测卡应在保质期内一次性使用，拆开包装后尽量在一个小时内用完；使用前将检测卡和待检样本恢复至室温；请勿触摸检测卡中央的白色膜面；滴管不可混用，以免交叉污染。

检测时避免阳光直射和电风扇直吹；请勿使用自来水、纯化水或蒸馏水作为阴性对照；如样品非常粘稠，有可能导致样品无法层析，此时可适当多滴1～2滴。