海南产温莪术挥发油成分分析

黄娴，潘路，王春桃

(1.海南碧凯药物研究所有限公司，海南海口 570216；2.海南省食品药品检验所，海南海口570216)

·药物与临床·

海南产温莪术挥发油成分分析

黄娴1，潘路1，王春桃2

(1.海南碧凯药物研究所有限公司，海南海口 570216；2.海南省食品药品检验所，海南海口570216)

目的分析海南产温莪术挥发油的化学成分，为其资源利用和质量评价提供依据。方法采用水蒸气蒸馏法提取挥发油，以海南产的温莪术挥发油和浙江产的温莪术挥发油为研究对象，采用GC-MS法、HPLC色谱法，根据《中国药典》公布的莪术油的质量标准分析其挥发油的化学成分。结果海南产温莪术挥发油与浙江产温莪术挥发油的成分基本一致，两种挥发油的特征图谱与《中国药典》2010年版公布的莪术油的特征图谱比对，相似度均达到95%以上。结论不同产地的温莪术挥发油成分有一定的差异，但主要成分基本相同，为海南产温莪术的开发利用提供了科学依据。

温莪术；挥发油；成分；气相色谱-质谱；高效液相色谱

温莪术为姜科植物温郁金(Curcuma wenyujin Y. H.Chen et C.Ling)的干燥根茎，其性温，味辛、苦，具行气破血、消积止痛功能，主要用于癥瘕痞块，瘀血经闭，胸痹心痛，食积胀痛。温郁金主要分布于浙江省南部，生态相似度90%～100%区域有浙江、江西、湖南、福建、广西、贵州、广东、云南、海南等省[1]。

温莪术主要含有挥发油，我国对温莪术的研究较多，温莪术挥发油(莪术油)已收入《中国药典》2010年版一部[2]。莪术油由温莪术药材经水蒸气蒸馏制得，具有抗癌、抗病毒、抗炎及保肝等多种药理活性[3]，目前对莪术油的分析有气相色谱法(GC)、气相色谱-质谱联用法(GC-MS)以及收载于《中国药典》一部的高效液相色谱法(HPLC)[4]。

本文以海南产的温莪术挥发油和浙江产的温莪术挥发油为研究对象(两种油均为水蒸气蒸馏所得)，采用GC-MS法分析两种不同产地的莪术油的化学成分，采用HPLC法定性、定量分析其主要成分，同时利用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)”与《中国药典》2010版公布的莪术油的特征图谱比较两种不同产地莪术油的相似度，以期对海南产温莪术的药用价值，开发利用提供依据。

1 材料与方法

1.1 仪器与材料DSQⅡGC/MS(ThermoFisher美国)气-质联用仪，柱型：TG-5SilMS 30 m×0.25 mm× 0.25 μm；岛津LC-2010A HT高效液相色谱仪；赛多利斯BP211D电子分析天平；温莪术(①产于浙江乐清，②2008年引种至海南省兴隆南药园，由齐耀东鉴定为温莪术Curcuma wenyujin Y.H.Chen et C. Ling)。

1.2 试剂无水乙醇(分析纯)：国药集团化学试剂有限公司，批号 20120903；乙酸乙酯(分析纯)：广州化学试剂厂，批号20120403- 2；乙腈：TEDIA，批号LOT12010654。

1.3 方法

1.3.1 莪术油的提取与样品制备取温莪术干品粉碎后用水蒸气直接蒸馏提取莪术油，提取时间为24 h。取莪术油适量，用乙酸乙酯稀释后制成气质联用分析样品备用；取莪术油适量，用无水乙醇稀释后制成高效液相色谱分析样品备用。

1.3.2 质谱条件DSQⅡGC/MS(ThermoFisher美国)气-质联用仪，TG-5SilMS毛细管柱(30 m× 0.25 mm×0.25 μm)；进样口温度240℃，程序升温，初温为140℃，保持35 min，以每分钟10℃的速率升温至200℃，保持3 min；载气为氮气(纯度：99.999%)；EI电离源，70Ev，离子源温度为250℃；扫描质量范围50～500 amu。

1.3.3 液相色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，水为流动相B，进行梯度洗脱，梯度为：0～20 min是等比例的把A60%和B40%变换成A95%和B5%，21～35 min维持A95%和B5%；检测波长为216 nm。

1.3.4 成分分析海南产温莪术油及浙江乐清产温莪术挥发油所得质谱图经计算机处理和标准质谱图库检索，确定化合物，按面积归一化法计算样品中各化合物在挥发油中的相对百分含量。

2 结果

2.1 海南产温莪术及浙江乐清产温莪术挥发油含量比较海南产温莪术及浙江乐清产温莪术挥发油含量差异不大。海南产温莪术挥发油含量约为2.9%，浙江乐清产温莪术挥发油约为3.0%。

2.2 海南产温莪术及浙江乐清产温莪术挥发油成分分析海南产温莪术油及浙江乐清产温莪术挥发油所得质谱图见图1～2，挥发油化学成分析见表1。海南产温莪术挥发油共有成分71种，浙江乐清产温莪术挥发油共有成分72种。两者的相对含量具有一定的差异，但差异不大。

图1 浙江乐清产温莪术挥发油总离子流图

图2 海南产温莪术挥发油总离子流图

表1 海南产温莪术及浙江乐清产温莪术挥发油化学成分及其相对含量

续表1

海南产温莪术与浙江产温莪术的挥发油其液相色谱图与《中国药典》2010年版一部提供的对照指纹图谱比对(见图3)，按中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算，海南产温莪术挥发油的相似度为97.2%，浙江乐清产温莪术挥发油相似度为99.3%，相似度均高于95%，符合《中国药典》2010年版一部莪术油指纹图谱的要求。

图3 温莪术挥发油色谱指纹图谱

2.3 主要有效成分含量分析《中国药典》2010年版一部莪术油含量测定项下的检测指标为含牻牛儿酮(C15H22O)不得少于7.5%，含呋喃二烯(C15H20O)不得少于10.0%。照高效液相色谱法测定，海南产温莪术挥发油两批测定结果如下：第一批：牻牛儿酮含量为7.6%，呋喃二烯含量为13.0%；第二批：牻牛儿酮含量为8.0%，呋喃二烯含量为13.0%。均符合《中国药典》2010年版一部莪术油含量要求。

3 讨论

温莪术是我国的传统常用大宗药材，在传统中医学中已有几千年的应用历史。温莪术具有抗肿瘤、抗血小板聚集、抗菌、抗病毒、抗化疗、促进机体免疫力、抗白血病、抗癫痫、抗前列腺增生、拮抗致突变、益智和抗衰老、改善胃动力等药理作用，故在临床上应用极广。温莪术的相关制剂有注射液、滴眼液、栓剂、软膏剂、乳剂、霜剂、胶丸、环糊精包和物、微球及栓塞等。温莪术单一化学成分的研究也是国内外学者的研究热点，科学家们先后分离出约20来种莪术单一成分。其中《中国药典》2010年版一部莪术油含量控制指标呋喃二烯、牻牛儿酮为抗病毒、抗癌活性成分[5-8]。

周欣等[9]在市售、温莪术油、浙江永嘉莪术油及瑞安陶川莪术油中分离得到65种不同成分。目前研究认为，莪术油的成分多为萜类及倍半萜衍生物。抗菌、抗病毒的主要成分是倍半萜类的莪术醇、莪术酮等[10]。本研究显示，海南产温莪术挥发油共有成分71种，浙江乐清产温莪术挥发油共有成分72种，两者的相对含量具有一定的差异，但差异不大。海南产温莪术挥发油、浙江乐清产温莪术挥发油均符合《中国药典》2010年版一部莪术油的质量标准要求，两者的化学成分差异不大。这对海南产温莪术的开发利用提供了科学依据。同时对温莪术在海南的规范化种植、资源开发都有重要的意义。

参考资料：

[1]陈士林.中国药材产地生态适宜性区划[M].北京:科学出版社, 2011:289-294.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部).2010年版[M].北京:中国医药科技出版社,2010:1.

[3]姚崇舜.天然药物温莪术[M].北京:人民卫生出版社,2008:10.

[4]郭丽娟,张云,丛晓东,等.温郁金主要成分含量测定及指纹图谱研究进展[J].中国中医药信息杂志,2011,18(4):101-103.

[5]Sun XY,Zheng YP,Lin DH,et al.Potential anti-cancer activities of Furanodiene,a Sesquiterpene from Curcuma wenyujin[J].Am J Chin Med,2009,37(3):589-596.

[6]Ba ZZ,Zheng YP,Zhang H,et al.Potentialanti-cancer activity of furanodiene[J].Chin J Cancer Res,2009,21(2):154-158.

[7]Ma E,Wang X,Li Y,et al.Induction of apoptosis by furanodiene in HL60 leukemia cells through activation of TNFR1 signaling pathway[J].Cancer Lett,2008,271:158-166.

[8]郑艳萍,孙秀燕,巴真真,等.呋喃二烯的体内外抗肿瘤作用研究[J].烟台大学学报:自然科学与工程版,2008,21(2):115-118.

[9]周欣,梁光义.不同产地莪术挥发油的研究[J].华西药学杂志, 2002,17(3):201-203.

[10]曹利娟,刘华钢,刘丽敏,等.莪术油近五年的研究进展[J].中国中药,2010,16(3):447-450.

Composition analysis of essential oil of Curcuma wenyujin Rhizoma from Hainan Province.

HUANG Xian1,PAN Lu1,WANG Chun-tao2.1.Hainan Bikai Institute of Materia Medica Co.,Ltd.Haikou 570216,Hainan,CHINA;2. Hainan Provincial Institute for Drug and Food Control,Haikou 570216,Hainan,CHINA

ObjectiveTo analyze the essential oil compositions of Curcuma wenyujin Rhizoma from Hainan Province in order to provide identifiable ground for the use of resources and quality evaluation.MethodsEssential oil of Curcuma wenyujin Rhizoma from Hainan Province and from Zhejiang Province was selected as the research objects.These essential oil were extracted by steam distillation.They were analyzed and determined by gas chromatography-mass spectrometry(GC-MS)and high performance liquid chromatography(HPLC),compared with the quality standards of"China pharmacopoeia".ResultsEssential oil compositions of Curcuma wenyujin Rhizoma from Hainan Province and Zhejiang Province were consistent.Similarity of characteristic chromatogram of two essential oils reached more than 95%compared with Chinese pharmacopoeia characteristic chromatogram(2010)of Curcuma wenyujin Rhizoma.ConclusionEssential oil compositions of different origin are similar.The study provided scientific basis for the development and utilization of Curcuma wenyujin Rhizoma from Hainan Province.

Curcuma wenyujin Rhizoma;Essential oil;Composition;GC-MS;HPLC

R93

A

1003—6350（2014）20—3024—04

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.20.1188

2014-02-28)

海南省重大科技项目(编号：ZDZX2013008)；海南省中药现代化专项课题(编号：ZY201315)

王春桃。E-mail：wangchuntao903@163.com