土鳖虫冻干粉对高脂饮食肉兔血脂的影响

白秀娟，任慧君，罗哲容，王慧，赵志壮，冷雪冰

（1.东北农业大学动物科学技术学院，哈尔滨 150030；2.东北农业大学生命科学学院，哈尔滨 150030；3.吉林农业大学中药材学院，长春 130118）

土鳖虫冻干粉对高脂饮食肉兔血脂的影响

白秀娟1，任慧君2，罗哲容2，王慧1，赵志壮1，冷雪冰3

（1.东北农业大学动物科学技术学院，哈尔滨 150030；2.东北农业大学生命科学学院，哈尔滨 150030；3.吉林农业大学中药材学院，长春 130118）

为研究土鳖虫冻干粉对高脂饮食肉兔血脂生理指标的影响，选择健康的150只肉兔随机分成5组，即空白组、高脂组和三个不同剂量组（0.4、0.2、0.1 g·kg-1土鳖虫冻干粉），每20 d每组随机抽取5只肉兔心脏静脉血，分离血清，用于测量血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量。结果表明，高脂组血脂水平显著高于空白组（P＜0.05）；高剂量组和低剂量组TC、TG显著高于空白组（P＜0.05），与高脂组差异不显著（P＞0.05）；高、中、低剂量组LDL-C均显著高于空白组和高脂组（P＜0.05）；中剂量组TC、TG、LDL-C水平显著低于高脂组（P＜0.05），与空白组差异不显著（P＞0.05）。结果显示，土鳖虫冻干粉可抑制高脂饮食肉兔血脂水平升高，具有调节血脂作用。中剂量组（0.2 g·kg-1）为最佳剂量。

土鳖虫；冻干粉；肉兔；血脂；高脂饲料

土鳖虫别名地鳖虫、土元等，动物分类为节肢动物门昆虫纲鳖蠊科（Corydi-idae）昆虫地鳖（Eupolyphaga sinensisWalker）或冀地鳖（Steleopha⁃ga plancyiBoleny），以其雌虫干燥体入药，味咸，性寒；有小毒；归肝经。具有逐瘀、破积、通络、消肿止痛等功效[1]。付英杰等研究表明，土鳖虫中含氨基酸、挥发油、脂肪酸、生物碱和脂溶性维生素等化学成分[2]。田军鹏等药理研究发现，土鳖虫有调节血脂、抗凝血、抗血栓、抗肿瘤等作用[3]。

传统炮制方法主要有净制法、炒制法、酒制法、酥油制法、盐水烫制法、土制法和烘焙法等[4]，但这些炮制方法破坏药物原始性状，在炮制过程中造成药物氧化和污染。冻干粉是在无菌环境下将药物冷冻成固态，抽真空将水分升华干燥而成的无菌粉，与其他炮制方法比，保持药物原始性状及结构，防氧化，提高药物纯度。所以本试验将新鲜土鳖虫制成土鳖虫冻干粉，研究土鳖虫对高血脂的预防和保健作用，为土鳖虫开发利用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验动物与分组

选择三月龄平均体（2.00±0.20）kg的健康雄性伊拉肉兔150只，随机分成5组，每组30只，分别为空白组：饲喂普通基础颗粒料；高脂组：饲喂高脂饲料；高剂量组：高脂饲料+土鳖虫冻干粉0.4 g·kg-1（兔每千克体质量喂0.4 g土鳖虫冻干粉，下同）；中剂量组：高脂饲料+土鳖虫冻干粉为0.2 g·kg-1；低剂量组：高脂饲料+土鳖虫冻干粉为0.1 g·kg-1。单笼饲养，自由采水，根据适应期采食情况规定每只每日限食量，连续喂养40 d。

1.2 试验饲料

购进家兔普通基础颗粒饲料。高脂饲料配比为：0.5%胆固醇，10%猪油，9.5%蛋黄粉，80%普通饲料。活土鳖虫，购自山东临沂，由东北农业大学动物科学技术学院白秀娟教授鉴定，清理干净体表杂质后用冻干机进行粉末冻干，取出收集，密封后放入4℃冰箱保存备用。含药高脂饲料：1%土鳖虫冻干粉+99%高脂饲料粉，混匀后制成颗粒料（即100 g高脂饲料中含土鳖虫冻干粉1 g）。根据药量计算后饲喂高、中、低剂量组，待食完后给与高脂饲料补充至规定食量。每10 d称体重1次调整含药高脂饲料的饲喂量。

1.3 试剂和仪器

1.5mL离心管、5 mL注射器、采血管，均购自哈尔滨伊事达生物工程有限公司；TGL-16GA型高速离心机，微量移液器，FD-8型冻干机，PL2002型电子天平，饲料制粒机，均由东北农业大学动物遗传实验室提供。

1.4 指标检测

试验开始前1 d晚上禁食不禁水，约12 h后（使肉兔空腹）随机抽取5只肉兔心脏静脉血4～5 mL，静置至析出血清，分离出血清到新的离心管，3 000 r·min-1离心10 min，取出后微量移液器抽取上层透明血清1 000 μL至新的离心管。试验开始前1 d（记为第0天，下同）、第20天和第40天肉兔心脏静脉采血，40 d共计采集血清3次。编号后送到吉化总医院检验科，全自动生化分析仪测量血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量。

1.5 统计学分析与数据处理

数据用Excel 2003初步统计，采用SPSS 17.0统计分析软件进行数据处理，进行显著性分析。采用单因素ANOVA，Duncan′s多重比较，计量资料以均数加减标准差（x±s）表示，P＜0.05认为差异有统计学意义，差异显著。

2 结果与分析

2.1 总胆固醇

土鳖虫冻干粉对肉兔血脂TC的影响见表1。结果可知，第0天（试验前1 d，下同），各组TC含量差异均不显著（P＞0.05）。第20天，高脂组和高、中、低剂量组TC含量均有所升高，但各组TC含量差异均不显著（P＞0.05），说明在这一时期，土鳖虫冻干粉作用效果不明显。第40天，高脂组TC含量显著高于空白组（P＜0.05），说明本试验高脂饲料可以显著升高肉兔血脂TC水平；高、低剂量TC含量显著高于空白组（P＜0.05），与高脂组差异不显著（P＞0.05）；中剂量组与空白组差异不显著（P＞0.05），而显著低于高脂组、高剂量组和低剂量组（P＜0.05）。说明土鳖虫冻干粉可抑制由高脂饮食引起TC水平升高，其中，中剂量组有显著效果。

表1 土鳖虫冻干粉对肉兔血脂TC的影响Table 1 Effects of eupolyphaga freeze-dried powder on TC of rabbits (mmol·L-1)

2.2 甘油三酯

土鳖虫冻干粉对肉兔血脂TG的影响见表2。结果可知，第0天，各组TG含量差异均不显著（P＞0.05）。第20天，各组TG含量差异均不显著（P＞0.05），但高脂组和高、中、低剂量组TG含量升高，且均高于空白组，高、中、低剂量组均低于高脂组，推测土鳖虫冻干粉抑制由高脂饮食引起的肉兔血脂TG上升速度。第40天，高脂组TG含量显著高于空白组（P＜0.05），说明本试验高脂饲料可显著升高肉兔血脂TG水平；高、低剂量组与空白组和高脂组差异均不显著（P＞0.05）；中剂量组与空白组比差异不显著（P＞0.05），显著低于高脂组（P＜0.05）。说明高、中、低剂量组均能抑制TG水平升高，但只有中剂量组效果显著。

表2 土鳖虫冻干粉对肉兔血脂TG的影响Table 2 Effects of eupolyphaga freeze-dried powder on TG of rabbits (mmol·L-1)

2.3 高密度脂蛋白胆固醇

土鳖虫冻干粉对肉兔血脂HDL-C的影响见表3。由结果可知，第0天，各组HDL-C含量差异均不显著（P＞0.05）。第20天，高脂组HDL-C含量有所降低，高、中、低剂量组有所升高，但各组含量差异均不显著（P＞0.05）。第40天，高脂组HDL-C含量有所降低，但与空白组差异不显著（P＞0.05）。高、中、低剂量组均显著高于空白组和高脂组（P＜0.05），说明土鳖虫冻干粉能显著升高血脂HDL-C水平。

2.4 低密度脂蛋白胆固醇

土鳖虫冻干粉对肉兔血脂LDL-C的影响见表4。由结果可知，第0天，各组LDL-C含量差异均不显著（P＞0.05）。第20天，高脂组和高、中、低剂量组LDL-C含量均有所升高，但各组差异均不显著（P＞0.05）。第40天，高脂组显著高于空白组（P＜0.05），说明高脂饲料使肉兔血脂LDL-C水平显著升高。高、中、低剂量组均与空白组差异不显著（P＞0.05），均显著低于高脂组（P＜0.05），说明，土鳖虫冻干粉能显著抑制因高脂饮食引起的血脂LDL-C水平升高，中剂量组显著低于低剂量组（P＜0.05），说明中剂量组抑制效果最显著。

表3 土鳖虫冻干粉对肉兔血脂HDL-C的影响Table 3 Effect of eupolyphaga freeze-dried powder on HDL-C of rabbits (mmol·L-1)

表4 土鳖虫冻干粉对肉兔血脂LDL-C的影响Table 4 Effect of eupolyphaga freeze-dried powder on LDL-C of rabbits (mmol·L-1)

3 讨论与结论

本试验第40天，高脂组血脂TC、TG、LDL-C水平显著高于空白组，证明本试验高脂饲料能升高家兔血脂TC、TG、LDL-C水平。本试验高脂饲料降低血脂HDL-C作用不明显，推测与高脂饲料配方有关，有待进一步研究[5-6]。

土鳖虫具有调理血脂作用。于燕等发现土鳖虫水提液能显著降低血清中TC、TG和LDL-C含量[7]，升高HDL-C含量，具有量效关系，证明土鳖虫对血脂具有调节作用，与本文中剂量组试验结果一致。于燕等还发现土鳖虫水提液有调整脂质代谢、抗脂质过氧化反应、维持NO/ET（一氧化氮/内皮素）平衡、保护血管内皮，减少内皮素（ET）的合成与释放等功效[8]。土鳖虫冻干粉是否具有以上功能和功效有待进一步研究证实。王玉明等研究发现，土鳖虫可降低高血脂小鼠血液中TC、TG、LDL-C含量，提高血液HDL-C水平，降低动脉硬化指数，可能会对由高血脂引发的动脉粥样硬化和高脂肪饮食造成的脂肪肝具有一定预防和治疗作用[9-10]。王征等发现土鳖虫提取物可明显降低高脂血症大鼠体质量、TC、TG、LDL-C水平、肝脏脂肪含量，能提高HDL-C水平，并能明显抑制高脂血症大鼠胰脂肪酶活性，对高脂血症大鼠具有明显降脂作用[1]。由本试验结果可知，土鳖虫冻干粉高剂量组和低剂量组可以抑制因高脂饮食所致的血清TC、TG水平升高，但作用效果不显著（P＞0.05）。高剂量组和低剂量组可以显著抑制LDL-C水平的升高（P＜0.05），升高血脂HDL-C水平效果显著（P＜0.05）；中剂量组在第40天可以有效抑制高脂饮食肉兔TC、TG、LDL-C水平的升高，且作用效果显著（P＜0.05）。中剂量组也可以显著升高血脂HDL-C水平（P＜0.05）。说明土鳖虫冻干粉可以抑制高脂饮食肉兔TC、TG、LDL-C水平，升高HDL-C作用明显，且中剂量组降低血脂TC、TG、LDL-C水平的作用具有统计学意义。可见，土鳖虫冻干粉预防性给药能降低因高脂饮食而造成的血脂水平升高，具有一定的调脂作用。基于试验结果和用药成本的综合考虑，选取中剂量组（0.2 g·kg-1）为预防由高脂饮食引起的血脂升高的最佳剂量[11]。

本试验提供不同剂量土鳖虫冻干粉在不同时期对肉兔血脂中TC、TG、LDL-C、HDL-C含量的影响，可为研究土鳖虫冻干粉的作用机理提供依据。本试验高脂组TC、TG、LDL-C血脂水平与空白组差异显著（P＜0.05），为研究建立兔子高脂血症模型提供参考。

有关土鳖虫调节血脂作用机理研究较少，王凤霞等报道土鳖虫调节血脂的作用机理可能是土鳖虫中的一种脂肪酸—亚油酸，降低血清TC水平[12]；土鳖虫提取物可抑制胰脂肪酶活性，也很可能是其降血脂作用机理之一[1]；土鳖虫粉能降低肝脏TG含量，这可能与其减少肝中TG合成或增加TG转运有关，土鳖虫粉改善全血粘度作用为其调节脂质代谢机理之一[13]。土鳖虫调节血脂水平的有效成分和分子机理有待深入研究。

[1]王征,陈晓光,吴岩,等.土鳖虫提取物对高脂血症大鼠的降脂作用[J].中国实用医药,2009,33(4):3-4.

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Effect of eupolyphaga freeze-dried powder on the blood lipid of rabbit fed with high-fat diet

BAI Xiujuan1,REN Huijun2,LUO Zherong2,WANG Hui1,ZHAO Zhizhuang1,LENG Xuebing3>
(1.School of Animal Science and Technology,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China;2.School of Life Sciences,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China;3.School of Traditional Chinese Medicine,Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China)

To study the effects of eupolyphaga freeze-dried powder on blood lipids physiological indices in rabbits with high-fat diet.Total 150 rabbits were selected and randomly divided into five groups,control group,high-fat group and three different dosage eupolyphaga groups(0.4,0.2,0.1 g·kg-1eupolyphaga freeze-dried powder).Every 20 d,each group of randomly selected five rabbits to draw cardiac venous blood,separation of serum,used to measure the serum's total cholesterol(TC),triglyceride(TG),high-density lipoprotein cholesterol(HDL-C),low density lipoprotein cholesterol(LDL-C)levels.The results showed that the blood lipid of high-fat group was abnormal,compared with control group,the levels were significantly increased(P＜0.05);Compared with control group,the levels of TC,TG in high group and low group were significantly increased(P＜0.05),no significant differences(P＞0.05)were observed between high group,low group and high-fat group.Compared with control group and high-fat group,the levels of LDL-C in high group,medi-um group and low group were significantly increased(P＜0.05);Compared with high-fat group,TC,TG, LDL-C of medium group were significantly reduced(P＜0.05).No significant differences(P＞0.05)were observed between the medium group and control group.Results showed that theEupolyphagaFreeze-dried powder can inhibit the rise of the blood lipid of rabbit fed with high-fat diet and regulate blood lipid.The results showed that eupolyphaga freeze-dried powder could inhibit the rise of the blood lipid of rabbit fed with high-fat diet,could regulate blood lipid.Medium group(0.2 g·kg-1)was the best dosage.

eupolyphaga;freeze-dried powder;rabbit;blood lipid;high-fat diet

Q959.9

A

1005-9369（2014）11-0071-05

2014-01-06

黑龙江省畜禽良种化工程项目（213122）

白秀娟（1963-），女，教授，博士，研究方向为经济动物繁殖与育种。E-mail:bxj630306@163.com

时间2014-11-21 16:27:00[URL]http://www.cnki.net/kcms/detail/23.1391.S.20141121.1627.001.html

白秀娟,任慧君,罗哲容,等.土鳖虫冻干粉对高脂饮食肉兔血脂的影响[J].东北农业大学学报,2014,45(11):71-75.

Bai Xiujuan,Ren Huijun,Luo Zherong,et al.Effect of eupolyphaga freeze-dried powder on the blood lipid of rabbit fed with high-fat diet[J].Journal of Northeast Agricultural University,2014,45(11):71-75.(in Chinese with English abstract)