不同等级甲醇对灯盏花素注射液紫外检测的影响

夏稷子， 安 军

(贵州省黔南州食品药品检验所，贵州 都匀558000)

现行灯盏花素注射液的质量标准采用的是《卫生部药品标准》中药成方制剂质量标准，其紫外鉴别及成分定量测定均采用紫外-可见分光光度法进行检测，以甲醇作为空白。但对灯盏花素注射液进行检验时发现，采用不同厂家、不同等级的甲醇作为溶剂时，紫外鉴别检测结果差异较大，为此做了一些相关试验。

1 仪器与试药

1.1 仪器 岛津2401 紫外-可见分光光度计，岛津UV 工作站。仪器经过贵州省计量测试院计量认证，证书编号:化(842)201303034 号。

1.2 试药 10 个厂家生产的不同等级(化学纯、分析纯、色谱纯)甲醇，灯盏花素注射液供试品(石药集团石药银湖制药有限公司生产，批号1011201182，规格:20 mg/5 mL)。

2 方法与结果

2.1 甲醇的紫外光谱检测 按照《中国药典》2010 版一部附录V A 紫外-可见分光光度法项下的方法，对不同厂家、不同等级的甲醇进行检查，即将甲醇置1 cm 石英吸收池中，以空气为空白(即光路中不置任何物质)测定其吸光度［1］。检测结果见表1。

2.2 甲醇对供试品紫外鉴别结果的影响 按照质量标准方法［2-4］，精密量取供试品适量 (约相当于灯盏花乙素5 mg)，置50 mL 量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取2 mL，置25 mL 量瓶中，用甲醇稀释至刻度摇匀。按照药典附录V A 规定的分光光度法测定，在284 nm 及335 nm波长处应有最大吸收。采用不同厂家、不同纯度等级的甲醇制备供试品溶液，照上述规定方法进行检测，结果见表2。

表1 不同厂家、不同等级甲醇紫外光谱检测结果

表2 不同厂家、不同等级甲醇制备的供试品紫外检测结果

3 讨论

3.1 常用化学试剂一般分为基准试剂、优级纯、分析纯和化学纯四个等级，通常制备试液、缓冲液等均可采用分析纯或化学纯试剂［2］。《中国药典》对高效液相色谱分析所用试剂明确规定要用色谱纯，而对紫外-可见分光光度法使用试剂的纯度等级没有明确规定。即使是采用了分析纯的甲醇，也仍然可能出现检验结果的异常。因此在测定供试品前，应首先检查溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求，即以空气为空白，测定溶剂与吸收池的吸光度，在220 ～240 nm 范围内不得超过0.40，在241 ～250 nm 范围内不得超过0.20，在251 ～300 nm 范围内不得超过0.10，在300 nm 以上时不得超过0.05［2］。本实验结果显示，所测10 个厂家不同纯度等级甲醇中，除上海星可在283 nm、334 nm 波长处分别有吸收外 (吸光度分别为0.038 1、0.034 5)，其他厂家和等级中的甲醇在 (284 ± 2)nm、(335 ±2)nm 波长处都没有检测出吸收，说明所测甲醇的确都符合药典的基本要求。

3.2 在实验中，按照“2.2”项下的方法对灯盏花素注射液进行紫外检测，结果显示在10 个供试品中，有3 个供试品(供试品3、供试品4、供试品5，见表2)虽然在(335 ±2)nm 波长处有最大吸收，但在(284 ±2)nm 处无最大吸收，按照质量标准，结果应为不符合规定。为查找原因，按照“2.1”项下的方法，将不同厂家、不同纯度的甲醇在251 nm ～400 nm 波长范围内进行了紫外光谱扫描，结果发现:上海振兴甲醇在273 nm 波长处的吸光度为0.152 7，在359 nm 波长处的吸光度为0.172 3;重庆茂业甲醇在275 nm 波长处的吸光度为0.362 3;广东新华甲醇在272 nm 波长处的吸光度为0.210 3，在259 nm 波长处的吸光度为0.213 3。均大大超过了《中国药典》在相应波长下检测所应符合的吸光度标准上限;而其他厂家的甲醇虽然在不同的波长处也各有吸收，但吸光度均在《中国药典》规定的范围内。实验结果还显示，用紫外光谱扫描吸光度不符合《中国药典》规定的3 种甲醇制备的供试品，在(284 ±2)nm 波长处都没有最大吸收，但所测甲醇在(273 ±2)nm 波长处则均有吸收，且吸光度都大于0.10。此外，成都化学、益林化工两种甲醇在(273 ±2)nm 波长处也有吸收，但吸光度都小于0.10。因此认为，在这几种吸光度不符合药典规定的甲醇中，可能含在(273 ±2)nm波长处有吸收的、具有相同特性的杂质，从而干扰了供试品的吸收，造成供试品在 (284 ± 2)nm 波长处无最大吸收。

3.3 本实验研究结果表明，实验的溶剂规格等级(如分析纯和化学纯)对供试品紫外鉴别结果没有明显的影响，而所用溶剂所含的杂质才对实验结果有较大影响。当溶剂不纯含有杂质时，便可能增加供试品紫外鉴别干扰吸收［1］。为消除这类可能的影响，建议无论使用何种规格等级的试剂，在对溶剂按照药典规定的方法在供试品所用波长附近测定吸光度的同时，还应该有一个在相应波长范围内的吸光度检测。只有在溶剂检测结果全都符合《中国药典》规定的情况下，才能确保药品质量检验结果的准确性和可靠性。

［1］ 国家药典委员会. 中华人民共和国药典:2010 年版一部［S］. 北京:中国医药科技出版社，2010:附录30-31.

［2］ 江冬英，胡巧云. 不同厂家灯盏花素注射液指纹图谱研究［J］. 中国医药指南，2012，12(18):80-82.

［3］ 黄晓燕，丁 野，郑金凤，等. 灯盏花素滴丸的溶出度研究［J］. 中国实验方剂学杂志，2013，19(16):82-85.

［4］ 方 睿，王成芳，刘子沐，等. 灯盏花素凝胶剂的制备和质量控制［J］. 中国实验方剂学杂志，2011，17(24):52-54.