杨林松,张燕宁,何伟志
(1.长江大学农学院, 湖北 荆州 434025;2.中国农业科学院植物保护研究所,北京 100094)
家蚕(Bombyx mori L.)属鳞翅目蚕蛾科,是起源于我国的一种泌丝昆虫。我国在五千多年前的新石器时代已开始植桑养蚕[1]。目前养蚕,仍然是许多省份的特色农业,是农民经济收入的主要来源[2],因此,养蚕在我国农业生态系统中占有重要地位。近年来,农药使用愈加频繁广泛,因农药污染给蚕业生产带来的灾难性事故频频发生[3],给桑蚕养殖业带来了严重的经济损失。因此有许多学者针对农药对家蚕的毒性影响开展研究,主要集中在农药残留对家蚕生理变化的影响[4~8]。目前,我国及日本均要求农药申请登记注时需要提供其对家蚕的毒性试验资料,以此作为农药环境风险评估的基础数据。开展农药对家蚕的风险评估不仅为蚕桑养殖区合理使用农药提供科学依据,而且对保护桑蚕产业的可持续性发展具有重要的意义。
论文采用叶片饲喂法测定了6种农药制剂对家蚕的急性毒性,旨在了解我国常用农药对家蚕的急性毒性情况,为农药环境风险评估和生产上科学合理用药提供参考。
试验所用药剂均为中国农业科学院植物保护研究所实验室保存样品,且均在有效保质期内。40%丁草胺·五氟磺草胺悬乳剂、20%虫螨腈悬浮剂、50%氟环唑水分散粒剂、32%草铵膦·乙氧氟草醚可湿性粉剂、16000IU/mg苏云金杆菌水分散粒剂、5.7%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐悬浮剂。
家蚕(Bombyx mori L.),从山东广通蚕种集团有限公司引种,品种为菁松×皓月,实验室孵化,以二龄起蚕为试验材料,孵化率在99%以上。蚁蚕饲养和试验温度为23~27℃,相对湿度为70%~80%。
烧杯、容量瓶、恒温培养箱、培养皿、温湿度表、亚都加湿器、移液枪等。
准确称取或量取适量供试药剂,用蒸馏水配制并稀释药液,在预试验的基础上,按等比关系设置6个系列浓度和1个空白对照,每处理设置3次重复。在培养皿内饲养2龄起蚕,用不同浓度的药液完全浸渍桑叶10秒钟,晾干后分别置于培养皿内,每培养皿接入20头2龄蚁蚕。然后置于26±2℃,相对湿度75%~85%,要求空白对照死亡率不超过10%。
药剂处理后24、48、72h、96h观察并记录家蚕中毒症状及死亡数。用DPS软件计算供试样品对家蚕96h的毒力回归方程y=a+bx、至死中浓度(LC50)及95%置信限区间,并参照《化学农药环境安全评价试验准则》的标准划分各药剂对家蚕的急性毒性等级。(见下表1)
在实验室条件下,根据农药毒性等级划分标准,5.7%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐悬浮剂对家蚕急性半致死浓度LC50(96h)为2.56x10-3mg/L,对家蚕急性毒性等级为剧毒。16000IU/mg苏云金杆菌水分散粒剂对家蚕急性半致死浓度LC50(96h)为2.03mg/L,对家蚕急性毒性等级为高毒。20%虫螨腈悬浮剂对家蚕急性半致死浓LC50(96h)为6.60mg/L,对家蚕急性毒性等级为高毒。32%草铵膦·乙氧氟草醚可湿性粉剂对家蚕急性半致死浓度LC50(96h)为277mg/L,对家蚕急性毒性等级为低毒。40%丁草胺·五氟磺草胺悬乳剂对家蚕急性半致死浓度LC50(96h)为1046mg/L,对家蚕急性毒性等级为低毒。50%氟环唑水分散粒剂对家蚕急性半致死浓度LC50(96h)为1297mg/L,对家蚕急性毒性等级为低毒。
表1 6种药剂的剂量梯度(mg/L)
表2 6种药剂96h对家蚕急性毒性试验结果
根据表2可知,6种药剂对家蚕96h毒力大小(LC50值)依次为5.7%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐悬浮剂>16000IU/mg苏云金杆菌水分散粒剂>20%虫螨腈悬浮剂>32%草铵膦·乙氧氟草醚可湿性粉剂>40%丁草胺·五氟磺草胺悬乳剂>50%氟环唑水分散粒剂。
浸叶法是昆虫毒力测定中最常用的方法之一,在国内外已普遍采用,它能反映农药对家蚕的胃毒、触杀和熏蒸多种致毒效应,接近于田间农药对家蚕的实际危害情况。近年来,由于农药的不合理施用,导致环境污染严重,本实验希望能为合理用药提供依据。
农药对家蚕的毒性大小与家蚕品系、幼虫龄期及发育阶段等因素有关[10]。2龄蚕对农药最敏感,龄期越大,敏感性越低,因此,评价农药对家蚕的毒性,选择2龄幼虫作为试虫较为合理。另农药的评定时间有待评价24h和48h。
发达国家在农药环境毒性评价方面体制健全、管理严格,主要进行对鱼、鸟、蜜蜂、藻类和蚯蚓的毒性评价,我国在制定关于这几类非靶标生物的毒性评价准则时都与国外况进行了比较,并借鉴了其先进经验[11]。50%氟环唑水分散粒剂等低毒农药,虽对家蚕的急性毒性较低,但有待研究其慢性毒性是否影响家蚕的吐丝和正常生长。
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